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Peprotech細(xì)胞因子其他常見問題
點(diǎn)擊次數(shù)：2058 發(fā)布時(shí)間：2021-7-22
其他常見問題
● Peprotech細(xì)胞因子的穩(wěn)定性如何？
除特殊說明之外，Peprotech的細(xì)胞因子或重組蛋白均以凍干粉形式提供，這使得細(xì)胞因子或重組蛋白在室溫條件下便非常穩(wěn)定。盡管如此，還是建議將細(xì)胞因子或重組蛋白置于-20℃或-80℃儲(chǔ)存，可穩(wěn)定數(shù)年。
重懸后的細(xì)胞因子或重組蛋白，在4℃條件下可短期儲(chǔ)存1-2周左右的時(shí)間，具體請(qǐng)參考具體產(chǎn)品的COA。若要長(zhǎng)期儲(chǔ)存，需使用含載體蛋白的溶液稀釋已重懸的細(xì)胞因子或蛋白，分裝后請(qǐng)置于-20℃或-80℃儲(chǔ)存。為避免蛋白部分變性，在凍存期間請(qǐng)避免重復(fù)凍融循環(huán)。
● PeproTech細(xì)胞因子的內(nèi)毒素水平如何？
PeproTech大部分無動(dòng)物成分級(jí)別細(xì)胞因子的內(nèi)毒素水平均保證低于0.01 ng/µg蛋白，即0.1 EU/µg蛋白。對(duì)于大多數(shù)非無動(dòng)物成分級(jí)別的細(xì)胞因子，內(nèi)毒素水平保證低于0.1 ng/µg蛋白，即1 EU/µg。事實(shí)上許多細(xì)胞因子的實(shí)際內(nèi)毒素含量均低于說明書上標(biāo)注的內(nèi)毒素水平。
● ED50和units/mg均用來表示比活性(specific activity)，兩者之間有什么關(guān)聯(lián)？
ED50的定義是可誘導(dǎo)50%最大反應(yīng)的細(xì)胞因子濃度，而比活性(specific activity)是單位重量蛋白樣品中所含的活性單位。比活性單位(Specific Activity Units)只能用于表示蛋白的效能，且僅適用于劑量反應(yīng)曲線為S形的蛋白。以ng/ml為單位的ED50和以u(píng)nits/mg為單位的比活性之間的換算公式為：
● 比活性單位(specific activity units)和活性的國(guó)際單位(International Units)之間有什么關(guān)聯(lián)？
比活性單位和國(guó)際單位(IU)之間沒有直接的關(guān)聯(lián)，不能相互換算。
國(guó)際單位(IU)是與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品的活性單位(即IU/ng)比對(duì)后得出的活性數(shù)值，后者是在世界衛(wèi)生組織(WHO)領(lǐng)導(dǎo)的國(guó)際合作研究中確定的。WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品由英國(guó)國(guó)家生物制品檢定所(NIBSC)制備和提供。
簡(jiǎn)單地與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)而得出的蛋白活性國(guó)際單位(IU)常會(huì)出現(xiàn)偏差，原因是每個(gè)蛋白廠家所用的活性檢測(cè)方法很難一致，從而導(dǎo)致與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)后得到的國(guó)際單位(IU)值相互間不具可比性。想要實(shí)現(xiàn)真正的可比性，必須建立標(biāo)準(zhǔn)的活性檢測(cè)方法，以保證所得出的蛋白活性國(guó)際單位(IU)值僅與蛋白的質(zhì)量有關(guān)，而與蛋白的來源無關(guān)。
● PeproTech是怎樣得到蛋白活性的國(guó)際單位(IU)值的？
在可能的情況下，PeproTech通過將自己的產(chǎn)品與對(duì)應(yīng)的WHO標(biāo)準(zhǔn)品在自已的生物活性測(cè)試中進(jìn)行多次平行比對(duì)來得出國(guó)際單位(IU)值。多次對(duì)比可保證我們能夠排除因測(cè)試本身的不穩(wěn)定性(如產(chǎn)品批次，使用方法和測(cè)試方案等的變異性)而導(dǎo)致的異常值的出現(xiàn)。經(jīng)多次比對(duì)得出的結(jié)果可對(duì)我們產(chǎn)品的國(guó)際單位(IU)值進(jìn)行可靠的定量。
● 為什么收到Peprotech的細(xì)胞因子之后，在產(chǎn)品管中看不到任何蛋白團(tuán)塊或粉末狀產(chǎn)品？
與市場(chǎng)上的許多蛋白產(chǎn)品不同，PeproTech的產(chǎn)品中不含任何載體蛋白和其它添加物（如BSA, HSA和蔗糖等），并且常在最di含鹽量的溶液中凍干，結(jié)果是微量的蛋白在凍干過程中會(huì)沉積在管壁上，形成蛋白薄膜，有時(shí)肉眼觀察不到。建議在打開管蓋前用小離心機(jī)快速離心20-30秒，使附著在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底。盡管可能看不到蛋白團(tuán)塊，但Peprotech的質(zhì)控程序保證每管中的蛋白含量準(zhǔn)確無誤。