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Peprotech細胞因子其他常見問題
點擊次數(shù):1801 發(fā)布時間:2021-7-22
其他常見問題
● Peprotech細胞因子的穩(wěn)定性如何?
除特殊說明之外,Peprotech的細胞因子或重組蛋白均以凍干粉形式提供,這使得細胞因子或重組蛋白在室溫條件下便非常穩(wěn)定。盡管如此,還是建議將細胞因子或重組蛋白置于-20℃或-80℃儲存,可穩(wěn)定數(shù)年。
重懸后的細胞因子或重組蛋白,在4℃條件下可短期儲存1-2周左右的時間,具體請參考具體產品的COA。若要長期儲存,需使用含載體蛋白的溶液稀釋已重懸的細胞因子或蛋白,分裝后請置于-20℃或-80℃儲存。為避免蛋白部分變性,在凍存期間請避免重復凍融循環(huán)。
● PeproTech細胞因子的內毒素水平如何?
PeproTech大部分無動物成分級別細胞因子的內毒素水平均保證低于0.01 ng/µg蛋白,即0.1 EU/µg蛋白。對于大多數(shù)非無動物成分級別的細胞因子,內毒素水平保證低于0.1 ng/µg蛋白,即1 EU/µg。事實上許多細胞因子的實際內毒素含量均低于說明書上標注的內毒素水平。
● ED50和units/mg均用來表示比活性(specific activity),兩者之間有什么關聯(lián)?
ED50的定義是可誘導50%最大反應的細胞因子濃度,而比活性(specific activity)是單位重量蛋白樣品中所含的活性單位。比活性單位(Specific Activity Units)只能用于表示蛋白的效能,且僅適用于劑量反應曲線為S形的蛋白。以ng/ml為單位的ED50和以units/mg為單位的比活性之間的換算公式為:
● 比活性單位(specific activity units)和活性的國際單位(International Units)之間有什么關聯(lián)?
比活性單位和國際單位(IU)之間沒有直接的關聯(lián),不能相互換算。
國際單位(IU)是與國際標準品的活性單位(即IU/ng)比對后得出的活性數(shù)值,后者是在世界衛(wèi)生組織(WHO)領導的國際合作研究中確定的。WHO國際標準品由英國國家生物制品檢定所(NIBSC)制備和提供。
簡單地與國際標準品比對而得出的蛋白活性國際單位(IU)常會出現(xiàn)偏差,原因是每個蛋白廠家所用的活性檢測方法很難一致,從而導致與國際標準品比對后得到的國際單位(IU)值相互間不具可比性。想要實現(xiàn)真正的可比性,必須建立標準的活性檢測方法,以保證所得出的蛋白活性國際單位(IU)值僅與蛋白的質量有關,而與蛋白的來源無關。
● PeproTech是怎樣得到蛋白活性的國際單位(IU)值的?
在可能的情況下,PeproTech通過將自己的產品與對應的WHO標準品在自已的生物活性測試中進行多次平行比對來得出國際單位(IU)值。多次對比可保證我們能夠排除因測試本身的不穩(wěn)定性(如產品批次,使用方法和測試方案等的變異性)而導致的異常值的出現(xiàn)。經多次比對得出的結果可對我們產品的國際單位(IU)值進行可靠的定量。
● 為什么收到Peprotech的細胞因子之后,在產品管中看不到任何蛋白團塊或粉末狀產品?
與市場上的許多蛋白產品不同,PeproTech的產品中不含任何載體蛋白和其它添加物(如BSA, HSA和蔗糖等),并且常在最di含鹽量的溶液中凍干,結果是微量的蛋白在凍干過程中會沉積在管壁上,形成蛋白薄膜,有時肉眼觀察不到。建議在打開管蓋前用小離心機快速離心20-30秒,使附著在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底。盡管可能看不到蛋白團塊,但Peprotech的質控程序保證每管中的蛋白含量準確無誤。