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農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀檢測(cè)方法

2014-11-28  閱讀(1110)

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1.

農(nóng)殘?jiān)噭┡渲?/p>

 

緩沖溶液:

取一包緩沖劑,

加入

500ml

蒸餾水,

溶解攪拌均勻,

密閉、

避光、

陰涼處保存。

 

顯色劑:取顯色劑一瓶,加入

15ml

緩沖溶液溶解,

4

℃冰箱中保存。

 

底物:取底物一瓶,加入

15ml

蒸餾水溶解,

4

℃冰箱中保存。

 

乙酰膽堿酯酶:

取乙酰膽堿酯酶一瓶,

3ml

緩沖溶液溶解,

 4

℃冰箱中保

存。

 

2.

樣品處理

 

選取有代表性的蔬菜樣品,

擦掉樣品表面泥土,

剪成

1cm

見(jiàn)方碎片,

取樣品

1g

,放入燒杯或提取瓶中,加入

5ml

緩沖溶液,振蕩

1min

2min

,倒出提取液,

靜置

3min

5min

,待用。

 

注意:

樣品不可用水沖洗,

應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣。

為了保證取樣具有代

表性,

葉菜一般取來(lái)自不同植株葉片的葉尖部樣本,

果菜從不同個(gè)體的表皮處取

樣。

 

3.

對(duì)照溶液測(cè)試

 

在提取瓶中加入

2.5ml

緩沖溶液,再加入

100ul

酶液、

100ul

顯色劑,搖勻

后于

37℃放置

15

分鐘

(

每批樣品的控制時(shí)間必須一致

)

15

分鐘后再加入

100

μ

L

底物搖勻

,

此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)

,

應(yīng)立即倒入

1cm

比色皿,放入儀器比色池中,

將儀器調(diào)到測(cè)量界面

,

按操作指示面板按鍵區(qū)的

“對(duì)照”

按鈕,

儀器開始做對(duì)照。

3

分鐘后儀器自動(dòng)對(duì)照完成,對(duì)照完成后將對(duì)照樣取出,保持儀器界面不變。

 

注意:對(duì)照測(cè)試必須在*通道進(jìn)行,對(duì)照測(cè)試△

A

應(yīng)>

0.3

,若對(duì)照測(cè)試

的結(jié)果小于以上數(shù)值時(shí),儀器會(huì)自動(dòng)提示“對(duì)照錯(cuò)誤”

,須重新做對(duì)照,以保證

測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。

(

對(duì)照測(cè)試△

A<0.3

的原因:一是酶的活性不夠,二是反應(yīng)

溫度太低。

)

4.

樣品溶液測(cè)試

 

另取干凈的提取瓶,放入

2.5ml

樣品提取液,加入

100ul

酶液、

100ul

顯色

劑,搖勻后于

37℃放置

15

分鐘

(

放置的時(shí)間與對(duì)照液放置的時(shí)間必須一致

)

。

15

 

 

分鐘后再加入

100

μ

L

底物搖勻

,

此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)

,

應(yīng)立即倒入

1cm

比色皿,

放入儀器比色池中,按操作指示面板按鍵區(qū)的“測(cè)量”按鈕開始測(cè)量,

3

分鐘后

儀器測(cè)量完成,顯示測(cè)量結(jié)果。結(jié)果以酶被抑制的程度(抑制率)表示,當(dāng)蔬菜

樣品提取液對(duì)酶的抑制率≥

50%

時(shí),表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類

農(nóng)藥存在,樣品為陽(yáng)性結(jié)果,陽(yáng)性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)

2

次以上。

 

對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品,可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

 

5.

說(shuō)明

 

蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對(duì)酶有

影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類樣品時(shí),可采取整株(體)蔬

菜浸提。對(duì)一些含葉綠素較高的蔬菜,也可采取整株(體)蔬菜浸提的方法,減

少色素的干擾。

 

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