FICOLL PLUS 不連續(xù)密度梯度分離液使用說明

技術(shù)文檔編號：TBD0054SOP

ICLL PLUS不連續(xù)密度梯度分離液與梯度制備稀釋液配比稀釋后，可形成不同濃度（密度）梯度分離液，經(jīng)低速（200-1000g）離心于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)可達到滿意的細胞分離效果。FICOLL PLUS 不連續(xù)密度梯度分離液不穿透細胞，無毒害，成功的用于動物細胞的分離。

試劑組成

名稱：FICOLL PLUS 密度梯度原液 貨號：P1114  100ml  梯度制備稀釋液 100ml

【簡介】

FICOLL PLUS 不連續(xù)密度梯度分離液與梯度制備稀釋液配比稀釋后，可形成不同濃度（密度）梯度分離液，經(jīng)低速（200-1000g）離心于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)可達到滿意的細胞分離效果。FICOLL PLUS 不連續(xù)密度梯度分離液不穿透細胞，無毒害，成功的用于動物細胞的分離。

【操作方法】

• 不同濃度（密度）分離溶液的制備，使用梯度制備稀釋液參考下表將原液稀釋至所需濃度：

• 梯度分離層的制備：將梯度分離液由高密度至低密度逐層加入至離心管內(nèi)，加入后應(yīng)可見明顯的梯度界面。
• 上樣：根據(jù)不同目的細胞，加入不同體積血液樣品或單細胞懸液（樣本體積及細胞濃度不宜過高，否則影響細胞的分離及回收）。
• 離心：400-600g 離心 20-30min。根據(jù)不同樣本個體差異及目的細胞特點，用戶可適當調(diào)節(jié)離心力及離心時間（離心力zui大不超過 1000g）。
• 取樣：當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界面時，可逐層去除分離溶液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于分離液層中,則需要逐層收集。收獲含有分離液的細胞經(jīng) 2 次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。

【注意事項】

• 實驗全過程需在 20℃±2℃下進行，否則影響離心效果。
• 由于多層分離溶液之間密度差別不大，因此離心機加速、降速時要慢，要平穩(wěn)。
• 試劑瓶蓋需蓋緊，防止蒸發(fā)和污染。

【儲存條件及有效期】常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。

【特殊細胞分離試劑盒舉例】

1. 富含 NK 活性大顆粒淋巴細胞(LGL)的純化試劑盒（產(chǎn)品貨號：NK2011H）

• 淋巴母細胞純化和死細胞去除試劑盒（產(chǎn)品貨號：P1114B）
• 【人不同血細胞的漂浮密度】