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備注：本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗
產(chǎn)品名稱 :
Lentivirus concentration PL liquid
品牌 :
BIOMIGA
貨號 :
V2001-01
規(guī)格 :
25ML
50ML
250ML
500ml
5L
詳細(xì)信息 :
簡介：
通常是在低滴度的病毒。它用于貯存或進一步的應(yīng)用，常常需要將其濃縮。是一種快速，簡單，廉價的方法所需的，集中病毒和去除雜質(zhì)。描述BioVision的PEG病毒降水工具包提供了一個簡單，方便，節(jié)省時間的方法，集中病毒不超離心。該試劑盒可用于的小實驗室樣品或大型的高產(chǎn)量和高病毒滴度的病毒制劑。該試劑盒可用于集中在細(xì)胞培養(yǎng)基中或環(huán)境樣品的反轉(zhuǎn)錄病毒，桿狀病毒，慢病毒，和噬菌體等。病毒可以集中超過100倍。經(jīng)過優(yōu)化的病毒重新懸浮液提供zui大化病毒的
恢復(fù)40-100％取決于病毒的類型和來源。整個交易過程采用無毒的試劑。可用于濃縮的病毒感染，病毒DNA或RNA純化等
試劑儲存條件：
該解決方案是準(zhǔn)備使用和穩(wěn)定的12個月，在4℃或在-20℃下長期貯存。
協(xié)議：
步驟一：病毒生產(chǎn)
1感染的細(xì)胞，并允許孵育，只要必要的接近zui大病毒生產(chǎn)的應(yīng)變和細(xì)胞類型的組合。
2，7分鐘，于1000rpm離心培養(yǎng)。
3，重懸細(xì)胞沉淀在新鮮的培養(yǎng)基。一個額外的48小時的孵育。
4，離心機在14000rpm，15分鐘，以除去細(xì)胞文化。
5，收集上清，加入1倍體積的PEG溶液4倍體積的含有病毒上清。
6，放入冰箱冷藏過夜（穩(wěn)定在4°C）?2周。
7，2300RPM離心45分鐘。
8，除去上清液。
9，病毒顆粒重新懸浮在1/10到1/100的原始體積。
10，分裝在小樣品和存儲在-70°C使用。
注：
A）。對于高滴度的病毒制劑，再懸浮的體積應(yīng)限于至約3倍體積的白色沉淀，通常為1/10?1/100的原始樣品的體積。如果不溶性物質(zhì)中存在的病毒懸浮液，它可以通過離心除去在3,200 xg離心15分鐘，在4℃。
的B）。避免凍結(jié)和解凍周期，以zui大限度地提高病毒的恢復(fù)。
C）。痕量的病毒懸浮液中的PEG不會影響使用濃縮的病毒。在某些情況下，PEG可能會增加病毒感染效率。但是，如果需要，除去微量的PEG可以通過下面的過程：加入1倍體積的含有4 M氯化鉀和50mM的Tris-HCl，pH7.2的（未提供）的溶液的濃縮的病毒懸浮液中的3倍體積的。或者，固體KCl添加到病毒懸浮液中，至終濃度為1 M.坐在冰15-30分鐘。分拆在4℃下以12,000 xg離心10分鐘以除去沉淀物。仔細(xì)收集病毒上清。等分并存儲在-70℃下以供將來使用。
