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一步法RT-PCR反轉(zhuǎn)試劑盒簡介

時間:2013/1/6閱讀:3085
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備注:本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗

產(chǎn)品名稱 :
 一步法RT-PCR反轉(zhuǎn)試劑盒
品牌 :
 BIOMIGA
貨號 :
 RT0213-01
規(guī)格 :
 20次/50次/100次
詳細信息 :
 
產(chǎn)品簡介
 
一步法RT-PCR試劑盒是為從總RNA或mRNA中特異性的反轉(zhuǎn)和擴增目的RNA而設(shè)計的。該系統(tǒng)在一種優(yōu)化反應(yīng)體系中共用MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶的預(yù)混液,能夠檢測長達4.0 kb的RNA目的片段??俁NA的用量可從0.01 pg到2 μg之間,該試劑盒為50 μl的反應(yīng)體系。
 
試劑盒組分

產(chǎn) 品
RT0213-00
RT0213-01
RT0213-02
RT0213-03
Reactions
5
20
50
100
Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix
5 μL
20 μL
50 μL
100 μL
2× Reaction mix (optimized bμffer contains dNTP and Mg2+
125 μL
500 μL
1.25 mL
2×1.25 mL
5 mM Magnesiμm Sμlfate
125 μL
500 μL
1.0 mL
2×1.0 mL
dd H2O
150 μL
600 μL
1.5 mL
2×1.5 mL

保存條件
 
該試劑盒-20°C保存,在此條件下可保存二年。
 
產(chǎn)品特點
 
方便的一管式設(shè)置
*的RT-PCR緩沖液及性
高度敏感性、特異性及重復(fù)性
 
推薦RT-PCR反應(yīng)體系
 
建議用如下組成配制RT-PCR反應(yīng)起始液:
組分
50 μl 體系
終濃度
2× Reaction mix
25 μL
Enzyme mix
1.0 μL
 
Forward Primer (10 μM)
1.0 μL
200 nM
Reverse Primer (10 μM)
1.0 μL
200 nM
RNA template
× μL
Variable (0.01pg - 2μg)
Final Volμme (μL)
50 μL
用dd H2O補足50 μL體系
*如有必要,鎂鹽濃度可進一步優(yōu)化。
1.將反應(yīng)溶液在冰上解凍。
2.按下列熱循環(huán)程序進行反應(yīng),以便cDNA合成之后立刻進行PCR擴增。
     cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min
      變性: 1 cycle: 94°C for 2 min
      PCR 擴增: 40 cycles:
                     94°C for 15 s
                     55-65°C for 30 s
                     68°C for 1 min/kb
3.用凝膠電泳檢測RT-PCR擴增產(chǎn)物。
 

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