非洲裂谷熱抗體快速檢測卡(膠體金法)
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裂谷熱抗體快速檢測卡(膠體金法)
廣州健侖生物科技有限公司
裂谷熱病毒是白纖病毒科(Phenuiviridae)的一個(gè)成員,即布尼亞病毒目12個(gè)病毒科之一 ,絕大多數(shù)人間感染是與受感染動(dòng)物的血液或器官直接或間接接觸所造成的。病毒可通過宰殺、幫助接生、獸醫(yī)程序操作或處理畜體或胚胎期間處理動(dòng)物組織而傳染給人。因此,某些職業(yè)群體,如牧民、農(nóng)民、屠宰工人和獸醫(yī),感染的風(fēng)險(xiǎn)較高。
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臺(tái)盼藍(lán)(trypan blue)是一種細(xì)胞活性染料,是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一,常用于檢測細(xì)胞膜的完整性或檢測細(xì)胞的活力?;罴?xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色,而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。臺(tái)盼藍(lán)染色只需3-5分鐘即可完成,操作非常簡單。
一、染色原理
正常的活細(xì)胞,胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠阻止臺(tái)盼藍(lán),使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi),細(xì)胞不被臺(tái)盼藍(lán)染色;而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞,胞膜的通透性增加,臺(tái)盼藍(lán)染料可穿透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞,與解體的DNA 結(jié)合,使其著色,從而細(xì)胞變藍(lán)。
通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。因此,借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。
二、染液配制
4%臺(tái)盼藍(lán)母液:稱取4g臺(tái)盼藍(lán),加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾,4度保存。使用時(shí),用PBS稀釋至0.4%(相當(dāng)于再10倍稀釋)。
三、染色方法
制備單細(xì)胞懸液,并作適當(dāng)稀釋(106細(xì)胞/ml),取9mL細(xì)胞懸液移入試管中,加1mL 0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液,混勻。
四、結(jié)果觀察
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