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人卵巢癌細(xì)胞

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產(chǎn)品型號:

品       牌:其他品牌

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:上海市

更新時間:2025-03-04 10:57:13瀏覽次數(shù):78

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人卵巢癌細(xì)胞

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冷凍細(xì)胞操作步驟:

1.收集對數(shù)生長期細(xì)胞;
2.以25μl臺盼藍(lán)溶液稀釋25μl細(xì)胞懸液;用血球計數(shù)板計數(shù)并計算細(xì)胞存活率(至少應(yīng)該在90%以上);
3.細(xì)胞懸液在4℃ 條件下200磄離心10分鐘;
4.將沉淀的細(xì)胞重新懸浮在冷凍液中(大約5?06細(xì)胞/0.5 ml 冷凍液);
5.將細(xì)胞懸液加入到冷凍管中,每管0.5 ml;
6.將冷凍管置于-80℃冰箱中;
7.24小時后,將冷凍管移入液氮罐中;
8.在記錄本或電腦中記錄下每一個冷凍管的位置以確保在以后應(yīng)用時能夠找到每一個冷凍管。

細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟:
1.將冷凍管迅速由液氮轉(zhuǎn)入到37℃水浴中,冷凍管的頂部保持在水面以上以避免任何污染,不定時攪拌加速解凍;
2.當(dāng)細(xì)胞*解凍后,用含70%乙醇的紗布擦拭冷凍管消毒;
3.將解凍后細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含4℃預(yù)平衡培養(yǎng)液的試管中;
4.細(xì)胞懸液在4℃下200磄離心10分鐘;
5.棄上清,將細(xì)胞重新懸浮在新鮮培養(yǎng)液中;
6.將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,CO2孵箱中培養(yǎng);
7.是用倒置顯微鏡檢查細(xì)胞存活率以及細(xì)胞密度,如果細(xì)胞密度過高,用培養(yǎng)液稀釋至適宜濃度。


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