NCI-H520 (人肺鱗癌細(xì)胞)是由A.F. Gazdar等在1982年從一名肺鱗狀細(xì)胞癌患者的肺標(biāo)本中提取的,呈上皮細(xì)胞樣,為貼壁細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)信息:
細(xì)胞名稱(chēng):NCI-H520 (人肺鱗癌細(xì)胞)
細(xì)胞別稱(chēng):H520; H-520; NCI-HUT-520; NCIH520
細(xì)胞來(lái)源:肺癌
生長(zhǎng)特性: 貼壁細(xì)胞、上皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)條件: 1640+10%FBS
培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%
細(xì)胞含量:>1×10? 細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
NCI-H520細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
① 該細(xì)胞呈島狀聚集生長(zhǎng),控制消化時(shí)間尤為重要:消化時(shí)間過(guò)短時(shí),細(xì)胞不易從瓶(皿)壁脫落,吹打過(guò)度會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞碎裂增多,吹散不開(kāi)的細(xì)胞團(tuán)塊也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞堆積影響生長(zhǎng);消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也可能導(dǎo)致細(xì)胞傳代后漂浮增多;建議每隔一分鐘顯微鏡下觀察細(xì)胞消化狀態(tài),確認(rèn)細(xì)胞與細(xì)胞間明顯分離有間隙時(shí)再終止消化,使細(xì)胞盡量分散,避免聚團(tuán)。
② 消化傳代時(shí),吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免造成細(xì)胞碎裂增多;
③ 該細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)基中始終有少量漂浮的細(xì)胞碎片,背景中可看到少量黑點(diǎn),換液可暫時(shí)改善,但繼續(xù)培養(yǎng)仍會(huì)出現(xiàn)無(wú)法避免。以上都是常見(jiàn)現(xiàn)象,不影響細(xì)胞增殖和實(shí)驗(yàn);
④ 細(xì)胞生長(zhǎng)偏慢時(shí),可以提高5~10%血清濃度(血清總濃度不超過(guò) 20%)培養(yǎng)一段時(shí)間,待細(xì)胞狀態(tài)和生長(zhǎng)速度恢復(fù)正常后換回正常血清濃度。
⑤ 該細(xì)胞貼壁展開(kāi)較慢,復(fù)蘇24 h后,大部分細(xì)胞呈不規(guī)則多邊形或圓形,細(xì)胞形態(tài)未完Q展開(kāi),48 h后可見(jiàn)細(xì)胞開(kāi)始成片聚集生長(zhǎng);新復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞,可見(jiàn)較多漂浮,復(fù)蘇48 h內(nèi)可先不換液,保留漂浮細(xì)胞繼續(xù)貼壁;
⑥ 該細(xì)胞生長(zhǎng)速度中等,細(xì)胞匯合度達(dá)到80%以上時(shí)即可傳代,1:2傳代約2~3天可再次傳代,1:3傳代約3~4天可再次傳代;
運(yùn)輸和保存:
1、1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2、T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。