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關(guān)鍵詞:DUCHEFA Biochemie B.V.
簡介：我公司全國總代理,華東地區(qū)代理DUCHEFA Biochemie B.V.專業(yè)經(jīng)營進(jìn)口胎牛血清、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒、細(xì)胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高，代做ELISA實(shí)驗(yàn)等。
全國總代理,華東地區(qū)代理DUCHEFA Biochemie B.V.產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。全國總代理,華東地區(qū)代理范圍內(nèi)免費(fèi)運(yùn)輸，如出現(xiàn)運(yùn)輸質(zhì)量問題，我們可以包退換貨。DUCHEFA Biochemie B.V.完善的庫存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的純化技術(shù)，保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
品牌名稱：   DUCHEFA Biochemie B.V.

測序?qū)嶒?yàn)流程：
分子克隆的相關(guān)載體：DNA段的克隆需要合適的載體，載體或是質(zhì)粒，或是噬菌體，或是病毒，通常大多經(jīng)過人工改造。作為載體必須具備兩條件：一是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制，即必須具備復(fù)制原點(diǎn)；二是該載體必須具備適合的酶切位點(diǎn)，且這些酶切位點(diǎn)不在復(fù)制原點(diǎn)區(qū)域內(nèi)。以上兩條，保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆，載體上常有篩選標(biāo)記，如對(duì)抗菌素的抗性，某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。
服務(wù)要求： 
1、請(qǐng)以等形式告知我們服務(wù)的主要目的及具體要求。
2、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；RT－PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；從其它質(zhì)粒上酶切得到的DNA段等。
3、提供DNA段的電泳照片，并請(qǐng)標(biāo)明Marker有濃度。
4、提供載體來源與背景資料。
5、注明克隆使用的酶切位點(diǎn)以及是否需要平端連接等。
相關(guān)材料說明： 
1、對(duì)于實(shí)驗(yàn)材料中涉及病原體等危險(xiǎn)材料不接受。
2、實(shí)驗(yàn)中涉及的堿基序列請(qǐng)以的形式發(fā)到我中心。
3、實(shí)驗(yàn)中的使用載體要盡量提供背景資料：（質(zhì)粒大小，抗性，拷貝數(shù)，多克隆位點(diǎn)等）如果是商品化載體，請(qǐng)您提供生產(chǎn)廠家及標(biāo)準(zhǔn)名稱；如果所提供載體是您自己構(gòu)建的請(qǐng)注明大體結(jié)構(gòu)情況。
4、我中心可以提供常用的如（氨芐青霉素，氯霉素，卡那霉素）以外的抗生素需您提供。
5、您自己提供的引物如果為干品，請(qǐng)您標(biāo)注具體的OD數(shù)，如果是液體態(tài)，請(qǐng)您標(biāo)明濃度。
6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。（同時(shí)提供相應(yīng)的質(zhì)粒）；如果提供質(zhì)粒，則質(zhì)粒的量在4ug以上；如果提供的是PCR產(chǎn)物，則PCR產(chǎn)物量在5u以上（附上電泳圖）
7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時(shí)應(yīng)首先在液氮中速凍，保存在－80度的冰箱中，使用干冰運(yùn)輸。
載體DNA的選擇 
分子克隆載體
①質(zhì)粒:質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外遺傳因子，DNA呈環(huán)狀，大小為1-200千堿基對(duì)(kb)。在細(xì)胞中以游離超螺旋狀存在，很容易制備。質(zhì)粒DNA可通過轉(zhuǎn)化引入寄主菌。在細(xì)胞中有兩種狀態(tài)，一是"緊密型";二是"松弛型"。此外還應(yīng)具有分子量小，易轉(zhuǎn)化，有一至多個(gè)選擇標(biāo)記的特點(diǎn)。質(zhì)粒型載體一般只能攜帶10kb以下的DNA段，適用于構(gòu)建原核生物基因文庫，cDNA庫和次級(jí)克隆。
②噬菌體DNA:常用的λ噬菌體的DNA是雙鏈，長約49kb，約含50個(gè)基因，其中50%的基因?qū)κ删w的生長和裂解寄主菌是必需的，分布在噬菌體DNA兩端。中間是非必需區(qū)，進(jìn)行改造后組建一系列具有不同特點(diǎn)的載體分子。λ載體系統(tǒng)zui適用于構(gòu)建真核生物基因文庫和cDNA庫。
M13噬菌體是一種*的載體系統(tǒng)，它只能侵襲具有F基因的大腸桿菌，但不裂解寄主菌。M13DNA(RF)在寄主菌內(nèi)是雙鏈環(huán)狀分子，象質(zhì)粒一樣自主復(fù)制，制備方法同質(zhì)粒。寄主菌可分泌含單鏈DNA的M13噬菌體，又能方便地制備單鏈DNA，用于DNA順序分析、定點(diǎn)突變和核酸雜交。
③柯斯(Cos)質(zhì)粒:是一類帶有噬菌體DNA粘性末端順序的質(zhì)粒DNA分子。是噬菌體-質(zhì)?；旌衔铩４祟愝d體分子容量大，可攜帶45kb的外源DNA段。也能象一般質(zhì)粒一樣攜帶小片段DNA，直接轉(zhuǎn)化寄主菌。這類載體常被用來構(gòu)建高等生物基因文庫。
【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結(jié)合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結(jié)合物 半抗原反應(yīng) 半抗原載體結(jié)合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質(zhì)/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細(xì)菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細(xì)胞質(zhì)蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細(xì)胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細(xì)胞裂解 組織提取 重組細(xì)胞因子 
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學(xué)緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學(xué)試劑 其它生化試劑
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR試劑 PCR對(duì)照 特異性PCR試劑盒 PCR克隆試劑盒 RNA 載體及構(gòu)建 PCR克隆載體 M13克隆載體 細(xì)菌克隆載體 文庫及構(gòu)建 cDNA文庫 基因組文庫 噬菌體展示文庫
【酶】限制性內(nèi)切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 連接酶
【cDNA及合成純化】cDNA全長基因 RNA cDNA合成 cDNA相關(guān)試劑
【核酸/蛋白合成】Oligo純化 核酸合成柱 核酸合成試劑
【克隆與表達(dá)】克隆基因 克隆試劑盒 克隆篩選
【表達(dá)分析】 Northern印跡分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝膠制備 蛋白電泳試劑 預(yù)制蛋白凝膠
【核酸純化】 DNA凝膠純化 DNA提取純化 PCR產(chǎn)物純化
技