應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞呈扁平多邊形,經(jīng)酶消化取自主動脈。在含多種因子培養(yǎng)基、37℃與 5% CO?環(huán)境下培養(yǎng)。其調(diào)節(jié)血管,異常時關(guān)聯(lián)動脈粥樣硬化等心血管病 。
人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞
人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞(HAECs)作為主動脈血管內(nèi)壁的組成細(xì)胞,呈扁平狀,緊密排列成單層,覆蓋在主動脈的內(nèi)表面。其形態(tài)常為多邊形,細(xì)胞間通過緊密連接、黏著連接等結(jié)構(gòu)相互作用,形成一個連續(xù)且致密的細(xì)胞層。這種結(jié)構(gòu)不僅維持了血管壁的完整性,還在調(diào)節(jié)血管內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮著重要作用。
獲取 HAECs 通常采用酶消化法。一般從合適的主動脈組織來源,如心臟搭橋手術(shù)獲取的廢棄血管段。在無菌條件下,將主動脈組織用生理鹽水沖洗干凈,去除血液及其他雜質(zhì)。隨后,使用胰dan白酶、膠原酶等消化酶對血管內(nèi)膜進(jìn)行處理。這些酶能夠分解細(xì)胞間的連接物質(zhì),使內(nèi)皮細(xì)胞從血管壁上分離下來。經(jīng)過過濾、離心等步驟,可得到較為純凈的 HAECs 懸液。在細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)節(jié),需要使用專門的培養(yǎng)基,如添加了胎牛血清、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)等成分的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基。血清提供了細(xì)胞生長所需的多種營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子,而 VEGF 和 bFGF 能特異性地促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、存活與遷移。培養(yǎng)環(huán)境需嚴(yán)格控制在 37℃、5% CO?的恒溫恒濕條件下,CO?用于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定,為細(xì)胞生長創(chuàng)造適宜的微環(huán)境。
在生理功能方面,HAECs 具有多種重要功能。首先,它是血液與血管壁之間的重要屏障,能阻止血液中的有害物質(zhì)進(jìn)入血管壁深層組織,同時允許營養(yǎng)物質(zhì)、氣體等進(jìn)行選擇性交換。其次,HAECs 參與血管張力的調(diào)節(jié)。它能分泌一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素 - 1(ET - 1)等血管活性物質(zhì)。NO 具有強(qiáng)大的舒張血管作用,可使主動脈擴(kuò)張,降低血壓;而 ET - 1 則能收縮血管,升高血壓。通過調(diào)節(jié)這些血管活性物質(zhì)的分泌,HAECs 維持著血管張力的平衡。再者,HAECs 在凝血與抗凝過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。正常情況下,內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)抗凝物質(zhì),抑制血小板的黏附和凝xue因子的激活,防止血栓形成。但在血管受損時,HAECs 又能迅速啟動凝血機(jī)制,促進(jìn)血栓形成,以阻止出血。此外,HAECs 還參與免疫調(diào)節(jié),能與循環(huán)中的免疫細(xì)胞相互作用,調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞向血管壁的募集和炎癥反應(yīng)的發(fā)生。
在疾病研究領(lǐng)域,HAECs 的異常與多種心血管疾病密切相關(guān)。例如,在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程中,高血壓、高血脂、高血糖等危險因素會損傷 HAECs。受損的內(nèi)皮細(xì)胞會分泌炎癥因子,吸引單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞黏附、遷移至血管壁下,逐漸形成粥樣斑塊。研究 HAECs 在動脈粥樣硬化中的病理改變,有助于深入理解疾病的發(fā)病機(jī)制,為開發(fā)抗動脈粥樣硬化的藥物和治療方法提供理論依據(jù)。又如,在肺動脈高壓中,HAECs 功能失調(diào)導(dǎo)致血管收縮和舒張失衡,血管壁增厚,肺循環(huán)阻力增加,最終引發(fā)肺動脈高壓。對 HAECs 在肺動脈高壓中的作用機(jī)制研究,也為該疾病的治療提供了新的思路和靶點。