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產品分類：抗生素    
儲存條件：—20℃,避光,12個月    
用途：細菌培養(yǎng)常用抗生素,用于配制含氨芐的LB或LB平板等。干擾肽聚糖的交聯(lián)從而抑制細胞壁的合成。    
注意事項：無菌溶液。工作濃度為50-100ug/ml。    

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用xi 鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

8人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

Human Endostatin elisa kit    人ELISA試劑盒    96T/48T

human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2 ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody,PR3-ANCA ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

APC70    轉錄激活蛋白crsp70抗體

ACTBL1    卵巢、胎盤、前列腺、睪丸蛋白22抗體

ANKRD33B    錨蛋白重復結構域蛋白33B抗體

APOC3    載脂蛋白C3抗體

Apoptosis enhancing nuclease    細胞凋亡增強核酸酶抗體

ATAD5    染色體脆弱性相關基因抗體

phospho-AKT (Ser473)    磷酸化蛋白激酶B抗體

ATP7B    銅轉運蛋白質β鏈抗體

ACSF4    ?；鞍?抗體

AHNAK2    AHNAK核蛋白2抗體

ARL6    二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體

ANO9    p53誘導蛋白5抗體

ANKRD5    錨蛋白重復域5抗體

ACCN2    腦鈉通道蛋白2抗體

ACCN4    腦鈉通道蛋白4抗體

ACCN5    小腸鈉通道蛋白5抗體

氨芐青霉su 溶液APXL    APXL蛋白抗體

ASIC3    酸敏感離子通道蛋白3抗體

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）     轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，將細胞稀釋至豐度不超過25%

2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。