凱杰Qiagen試劑盒203443/203445/203446

高特異性擴(kuò)增，用于多種PCR分析

• 高PCR特異性，無需優(yōu)化

• 操作簡(jiǎn)單，室溫下進(jìn)行反應(yīng)體系的構(gòu)建

• 即用型預(yù)混液，減少移液步驟

HotStarTaq Master Mix包含HotStarTaq DNA Polymerase、可將優(yōu)化需求*小化的*的QIAGEN PCR Buffer、以及dNTPs。預(yù)混液中提供各種所需組分，減少移液步驟，降低污染風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)提高通量和可重復(fù)性。

Performance

每一批HotStarTaq Master Mix Kit都經(jīng)過*的質(zhì)量控制測(cè)試，包括：嚴(yán)格的PCR特異性和可重復(fù)性分析，即使低拷貝的靶分子也可擴(kuò)增。通過檢測(cè)，HotStarTaq DNA Polymerase優(yōu)于其它供應(yīng)商提供的試劑盒，確保高度特異性和在熱啟動(dòng)PCR中的表現(xiàn)（參見"Higher specificity with different primer–template systems"、"Superior performance"和表格）。該試劑盒提供的新型PCR緩沖液使得在多種PCR條件下都維持高特異性，無需優(yōu)化（參見"Tolerance to variable magnesium concentration"）。

高度特異性配合簡(jiǎn)單的操作使HotStarTaq Master Mix Kit適用于復(fù)雜的基因組或cDNA模板（參見"Effect of hot start on RT-PCR performance"）、多重引物對(duì)（參見"Specific amplification in multiplex PCR"）、從珍貴樣本或低拷貝靶分子中抽提的模板（參見"Highly sensitive single-cell PCR"）。該試劑盒還適用于大量樣本的擴(kuò)增，諸如基因篩查等項(xiàng)目。

凱杰Qiagen試劑盒203443/203445/203446

HotStarTaq DNA Polymerase特性

濃度：5 units/µl
重組酶：是
底物類似物：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP
延伸速度：72°C條件下2–4 kb/min
酶半衰期：97°C條件下10 min，94°C條件下60 min
擴(kuò)增效率：≥10⁵倍
5'–>3'外切酶活性：是
額外添加A：是
3'–>5' 外切酶活性：否
核酸酶污染：否
蛋白酶污染：否
RNases污染：否
自啟活性：否

Principle

HotStarTaq Master Mix是一種即用型預(yù)混液，包含HotStarTaq DNA Polymerase、QIAGEN PCR Buffer和dNTPs。HotStarTaq DNA Polymerase是一種經(jīng)修飾的Taq DNA Polymerase，確保熱啟動(dòng)PCR的高特異性。

HotStarTaq DNA Polymerase

HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供，常溫下沒有聚合酶活性。避免PCR構(gòu)建和循環(huán)初始階段低溫條件下非特異性引物的延伸和引物二聚體的形成（參見"Superior performance in hot-start PCR"和"Higher specificity with different primer–template systems"）。95°C條件下孵育15分鐘即可激活HotStarTaq DNA Polymerase，這個(gè)步驟可整合入已有的熱循環(huán)程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通過提高每個(gè)PCR擴(kuò)增退火過程特異性引物的結(jié)合比例，確保PCR每個(gè)循環(huán)特異性擴(kuò)增（參見"Increased specificity of primer annealing"）。*的KCl和(NH₄)₂SO₄平衡組合，使得該緩沖液與傳統(tǒng)的PCR緩沖液相比在很寬的溫度和Mg²⁺濃度范圍內(nèi)都有嚴(yán)格的引物退火條件和高度的特異性，無需進(jìn)行耗時(shí)的優(yōu)化（參見"Tolerance to variable magnesium concentration"）。

Procedure

HotStarTaq Master Mix Kit以方便的預(yù)混液形式提供，易于使用。95°C條件下孵育15分鐘即可激活HotStarTaq DNA Polymerase，可以整合入已有的熱循環(huán)程序。在室溫下應(yīng)用該預(yù)混液可快速、簡(jiǎn)單地構(gòu)建反應(yīng)體系，只需將25 µl HotStarTaq Master Mix移入每個(gè)PCR反應(yīng)管，并加入25 µl溶于該試劑盒提供的不含RNase的純水中的引物和模板DNA（參見"HotStarTaq procedure"）。移液步驟*少化，降低操作誤差和污染風(fēng)險(xiǎn)，確保提高通量和可重復(fù)性。該試劑盒提供高效、經(jīng)優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)方案，用于快速、方便的PCR反應(yīng)體系構(gòu)建。

Applications

HotStarTaq Master Mix Kit適合多種應(yīng)用，包括各種富有挑戰(zhàn)性的研究，如各種擴(kuò)增應(yīng)用：

• 復(fù)雜的基因模板

• 復(fù)雜的cDNA模板（如RT-PCR）

• 低拷貝的靶分子（如單細(xì)胞PCR）

• 多重引物對(duì)反應(yīng)