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Hieff TransTM脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，讓您對轉(zhuǎn)染自信滿滿
——效率高不高，一轉(zhuǎn)便知道
>>>背景介紹
轉(zhuǎn)染能夠讓我們更好的研究目的基因是如何在細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)和調(diào)控。目前常見的轉(zhuǎn)染方法有：磷酸鈣共沉淀法、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、機械法（如顯微注射和基因槍法）、陽離子脂質(zhì)體試劑等，其中陽離子脂質(zhì)體試劑轉(zhuǎn)染是目前zui常用的轉(zhuǎn)染方法。
圖1：不同轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染示意圖（圖片來源于每日生物評論）
不同轉(zhuǎn)染方法的優(yōu)劣對比
| 轉(zhuǎn)染方法 | 優(yōu)勢 | 劣勢 |
| 磷酸鈣共沉淀法 | 價格低廉，操作較為簡單 | 轉(zhuǎn)染效率不穩(wěn)定，易發(fā)生DNA聚集等影響轉(zhuǎn)染的效率，高胞毒性，轉(zhuǎn)染效率較差 |
| 電穿孔法 | 效率高，適用于所有類型的細(xì)胞 | 電穿孔儀價格相對昂貴，細(xì)胞致死率高，核酸和細(xì)胞用量大 |
| DEAE-葡聚糖 | 對貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染比較有效，也可用于某些懸浮細(xì)胞，操作簡單、結(jié)果可重復(fù) | 對細(xì)胞有偏好性，對細(xì)胞有一定的毒副作用，且轉(zhuǎn)染時需要血清抑制細(xì)胞生長 |
| ploybrene聚凝胺 | 操作相對簡單、價格一般 | 效率低、應(yīng)用性有一定的局限 |
| 陽離子脂質(zhì)體試劑 | 操作簡單、效率高、適用性廣、重復(fù)性好、毒性低 | 價格略高于其他化學(xué)試劑 |
| 病毒侵染法 | 效率高、對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞、原代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效果很好 | 病毒包裝流程復(fù)雜、病毒有一定危險性 |
| polyethylenimine,PEI) | 價格低、操作簡單，適用范圍較廣 | 效率低于脂質(zhì)體類轉(zhuǎn)染試劑、一些細(xì)胞接觸后產(chǎn)生敏感反應(yīng) |
Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑作為一款陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，與應(yīng)用的Lipo2000相比，具有更高的轉(zhuǎn)化效率和更加便捷的操作。目前已經(jīng)在多種細(xì)胞系中得以驗證，具體可參見下文中驗證過的細(xì)胞系匯總。
>>>作用原理
陽離子能夠通過表面所帶正電荷的靜電作用將核酸包裹，形成核酸-脂質(zhì)體復(fù)合體。細(xì)胞膜表面帶負(fù)電荷，能夠?qū)⒃搹?fù)合體吸附，被吸附后的復(fù)合體能夠通過膜的融合作用或者細(xì)胞內(nèi)吞的方式形成包涵體進(jìn)入細(xì)胞。有小部分的DNA 能夠從包涵體中被釋放，并進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中，再進(jìn)一步進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。
圖2：脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染和內(nèi)吞過程
>>>Hieff TransTM轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品特點
高效性： 可對大多數(shù)真核細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，并且對于常見細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率達(dá)90%以上；
低毒性：轉(zhuǎn)染細(xì)胞形態(tài)良好并表達(dá)大量的轉(zhuǎn)染基因蛋白；
操作簡便：可以直接將脂質(zhì)體復(fù)合物加入到含血清的培養(yǎng)基中；
多樣性：適合瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染試驗。
>>>操作流程
圖3：細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗流程
>>>產(chǎn)品數(shù)據(jù)
圖4：轉(zhuǎn)染試劑雙質(zhì)粒驗證結(jié)果
驗證過的細(xì)胞系匯總
| 293T | 293FT | HEK293 | HEK 293T | Caco2 |
| COS-7 | DF-1 | Lenti X-293T | HeLa | HepG2 |
| LM3 | MCF-7 | MDA-MB-231 | MEF | NCI-H1975 |
| NIH-3T3 | PC12 | Raw264.7 | Vero | H9c2 |
| Hepa1-6 | MCF10A | CHO | 5-8F | BV-2 |
| A549 | 3t3 | H520 | HUVEC | C6 |
| HaCaT | N2A | SGC-7901 | H9 | MKN-28 |
| Hep 3B | SMCC7721 | RKO | C2C12 | More… |
>>>客戶反饋結(jié)果展示
| Hieff TransTM Liposomal 轉(zhuǎn)染應(yīng)用 | |
 |  |
| 細(xì)菌蛋白激活細(xì)胞自噬體形成 細(xì)胞：Hela 轉(zhuǎn)染質(zhì)粒：細(xì)菌效應(yīng)蛋白A LC3II:自噬體標(biāo)記蛋白 | 細(xì)胞分裂紡錘體結(jié)構(gòu) 細(xì)胞：Hela 轉(zhuǎn)染質(zhì)粒：Flag-tubulin 細(xì)胞核染色：Hoechst33342 |
| DNA轉(zhuǎn)染 | DNA轉(zhuǎn)染 | |||
 |  |  |  | |
| Hieff TransTM | Lipo3000 | Hieff TransTM | Lipo2000 | |
| 圖片來源：復(fù)旦大學(xué) 細(xì)胞系：Hek293 核酸類型：DNA | 圖片來源：長春應(yīng)化所 細(xì)胞系：Hela 核酸類型：DNA | |||
流式熒光觀察結(jié)果 |
Hieff TransTM (13.27%) Lipo2000 (8.64%) FuGenHD (9.24%) |
| 細(xì)胞系：C2c12 熒光蛋白：EGFP 核酸類型：DNA 數(shù)據(jù)來源：華南農(nóng)業(yè)大學(xué) |
客戶提供的部分細(xì)胞系轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)（僅供參考）
| 細(xì)胞 | 培養(yǎng)板 | 細(xì)胞密度 | DNA | Hieff TransTM | 效率 |
| 293T | 6孔 | 80% | 1μg | 2μL | 90% |
| 293FT | 24孔 | 85% | 1μg | 4μL | 90% |
| Hela | 12孔 | 90% | 0.2μg | 0.6μL | 90% |
| Raw264.7 | 35mm皿 | 80% | 1μg | 2μL | 90% |
| Hek293 | 6孔 | 95% | 2μg | 10μL | 80-90% |
| NCI-H1975 | 6孔 | 80% | 4μg | 10μL | 80% |
| 3t3 | 12孔 | 90% | 1μg | 5μL | 50% |
>>>價格比較
圖5：單次轉(zhuǎn)染反應(yīng)各公司價格對比
>>>FAQ
Q1：配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物時能否有血清的存在？
答：血清的存在會影響脂質(zhì)體的形成，建議配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物時采用無血清培養(yǎng)基（一般推薦MEM培養(yǎng)基）。
Q2：轉(zhuǎn)染實驗過程中是否需要更換成無血清培養(yǎng)基？
答：不需要，我們的轉(zhuǎn)染試劑可以在含血清的介質(zhì)中進(jìn)行轉(zhuǎn)染的過程。
Q3：轉(zhuǎn)染后需要進(jìn)行終止嗎？
答：不需要。脂質(zhì)體復(fù)合物可以穩(wěn)定存在6個小時。如果在進(jìn)行轉(zhuǎn)染前沒有進(jìn)行細(xì)胞換液，為了保證細(xì)胞正常生長所需的營養(yǎng)，需要在4～6小時后換用新的培養(yǎng)基。但如果轉(zhuǎn)染之前已進(jìn)行過換液則在脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后不需要進(jìn)行再次換液。
Q4：轉(zhuǎn)染試劑的保存及使用過程中的注意事項？
答：本試劑一定要4℃保存，要注意避免反復(fù)多次長時間開蓋，長時間開蓋會導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。
Q5：若想提高轉(zhuǎn)染效率，應(yīng)該注意什么？
答：a:轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的密度，90%-95%。
b:轉(zhuǎn)染時，核酸和脂質(zhì)體稀釋液要用MEM無血清培養(yǎng)基。
c:轉(zhuǎn)染后4-6h可選擇換液。
>>>使用客戶已發(fā)表文章
[1]. Hao, H., et al., Loss of Endothelial CXCR7 Impairs Vascular Homeostasis and Cardiac Remodeling After Myocardial Infarction: Implications for Cardiovascular Drug Discovery. Circulation, 2017. 135(13): p. 1253-1264.（IF 18.881）
[2] Zhang K, Zhao X, et al. Enhanced Therapeutic Effects of Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes with an Injectable Hydrogel for Hindlimb Ischemia Treatment. ACS Appl Mater Interfaces. 2018 Sep 12;10(36):30081-30091.（IF 8.09）
[3] Yang R, Yang E, et al. IL-12+IL-18 cosignaling in human macrophages and lung epithelial cells activates cathelicidin and autophagy, inhibiting intracellular mycobacterial growth. J Immunol. 2018 Apr 1;200(7):2405-2417.（IF 4.539）
[4] Cheng H, Fan X, et al. Cyclodextrin-Based Star-Like Amphiphilic Cationic Polymer as a Potential Pharmaceutical Carrier in Macrophages. Macromol Rapid Commun. 2018 May 28:e1800207. （IF 4.441）
>>>產(chǎn)品訂購
| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
| Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40802ES02 | 0.5 mL | 738 |
| Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40802ES03 | 1.0 mL | 1308 |
| Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40802ES08 | 5×1 mL | 4878 |
>>>相關(guān)產(chǎn)品推薦
| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑 | 40803ES70 | 200 T | 625 |
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/mL） | 40804ES76 | 500 μL | 180 |
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/mL） | 40804ES86 | 5×500μL | 500 |
| Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40805ES01 | 100μL | 228 |
| Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40805ES02 | 0.5 mL | 948 |
| Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40805ES03 | 1.0 mL | 1678 |
| Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40805ES08 | 5×1 mL | 5268 |
HB20190220
