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精品推薦|NGS實(shí)驗(yàn)小助手，純化、分選皆全能
進(jìn)口磁珠用量大，價(jià)格高，實(shí)驗(yàn)進(jìn)展不下去？
翊圣DNA純化分選磁珠，滿足您的需求！
DNA///片段純化與分選是高通量測(cè)序中文庫(kù)制備的必要環(huán)節(jié)。目前，市面上的AMPure XP磁珠幾乎占據(jù)半壁江山，但其高昂的價(jià)格令許多測(cè)序公司感到巨大的壓力。翊圣生物匠心研發(fā)專為二代測(cè)序設(shè)計(jì)的簡(jiǎn)單高效、高通量DNA純化分選精品—Hieff NGSTM DNA Selection Beads，可無(wú)縫替代AMPure XP產(chǎn)品，不僅性能優(yōu)異，而且質(zhì)優(yōu)價(jià)廉。
產(chǎn)品介紹
基于SPRI（Solid Phase Reversible Immobilization）原理，配合精心優(yōu)化的緩沖體系，可兼容不同品牌的DNA、RNA建庫(kù)試劑盒，使用方式相同，片段回收效率和文庫(kù)大小分布均與AMPure XP Beads高度吻合。主要應(yīng)用于二
代測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程中的DNA///片段分選、純化。
圖1 翊圣磁珠特點(diǎn)
產(chǎn)品亮點(diǎn)
亮點(diǎn)1 精準(zhǔn)分選-分選精度
分選精度一般是雙輪分選后DNA///片段的分布準(zhǔn)確性。目前市場(chǎng)上各廠家磁珠的buffer配方不同，對(duì)各個(gè)DNA///片段的回收比例也不盡相同。因而評(píng)估磁珠的分選精度不適合各品牌平行比較，而應(yīng)是根據(jù)各廠家推薦的比例，完成對(duì)應(yīng)大小的DNA///片段篩選。
通?？赏ㄟ^(guò)Agilent 2100檢測(cè)樣本分選后的片段分布。
磁珠分選實(shí)驗(yàn)，模式樣本，用XP磁珠和翊圣磁珠做平行實(shí)驗(yàn)，二者回收效率，片段大小基本一致。
圖2 翊圣磁珠不同分選比例峰圖
亮點(diǎn)2 高效純化-回收效率
磁珠回收效率一般是以回收后的DNA總量與初始的投入DNA總量的比值來(lái)計(jì)算。相同的DNA投入量，回收效率越高越好。但評(píng)估各品牌的磁珠回收效率首先要看磁珠回收的片段是否相同，只有在相同的回收效果時(shí)比較回收效率才有意義。
通常可通過(guò)Qubit定量回收前后的DNA總量計(jì)算回收效率。
平行 | 樣本 | Input（ng） | 純化（1.8×） | ||
純化后（ng） | 回收率% | 平均回收率 | |||
平行1 | A-XP | 169.5 | 153.25 | 90.41% | 90.41% |
B-YS | 159.75 | 94.25% | 94.5% | ||
C-YS | 162 | 95.58% | |||
D-YS | 158.75 | 93.66% | |||
平行2 | A-XP | 156 | 92.04% | 92.04% | |
B-YS | 156.5 | 92.33% | 93.51% | ||
C-YS | 160 | 94.4% | |||
D-YS | 159 | 93.81% | |||
圖3 翊圣磁珠和AMPure XP磁珠回收效率對(duì)比
案例展示
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>：核酸純化/分選
實(shí)驗(yàn)方案：1.8×（DNA純化）；0.65×/0.2×（DNA分選）
評(píng)估指標(biāo)：純化/分選后磁珠回收效率
磁珠純化/分選后條帶分布
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：相同樣本，DNA打斷后初始濃度是13 ng/ul，投入量159 ng，分別用翊圣DNA磁珠與AMPure XP磁珠回收后，平均回收效率分別為104.55%和96.23%。0.65×/0.2×分選后，平均回收率基本一致。
綜上可知翊圣DNA磁珠與AMPure XP磁珠回收效率相近，回收效果以及分選效果高度一致。
品牌 | 樣本編號(hào) | 1.8X純化后濃度（ng/μL） | 分選（0.65X/0.2X） | |||
投入量 | 回收量 | 回收率% | 平均回收率 | |||
XP | A1 | 6.40 | 148 ng | 30 ng | 20.27 | 21.28% |
A2 | 31.2 ng | 21.08 | ||||
A3 | 31.8 ng | 21.49 | ||||
A4 | 33 ng | 22.30 | ||||
翊圣 | B1 | 36.3 ng | 24.53 | 22.30% | ||
B2 | 34.5 ng | 23.31 | ||||
B3 | 30.9 ng | 20.88 | ||||
B4 | 30.3 ng | 20.47 | ||||
圖4 翊圣磁珠和AMPure XP磁珠分選數(shù)據(jù)
圖5 翊圣磁珠和AMPure XP磁珠分選峰圖
綜合分析，翊圣磁珠在不同樣本的適用性、大小片段的回收效率、分選精度和批次穩(wěn)定性方面基本相當(dāng)，但價(jià)格方面，翊圣磁珠優(yōu)勢(shì)明顯，可成為AMPure XP的*。
參數(shù) | Yeasen | AMPure XP |
樣本適用性 | ★★★ | ★★★ |
大片段回收效率 | ★★ | ★★★ |
小片段回收效率 | ★★★ | ★★★ |
DNA純化效率（NGS） | ★★★ | ★★☆ |
批間穩(wěn)定性 | ★★★ | ★★★ |
價(jià)格 | ★ | ★★★ |
分選精度 | —— | —— |
常見(jiàn)FAQ問(wèn)答：
Q1：產(chǎn)品的原理是什么？
A1：產(chǎn)品是基于SPRI（Solid phase reverse immobilization）原理制備的，其在特定條件下，可選擇性吸附不同片段大小的DNA。親和吸附分選。
Q2：產(chǎn)品的主要應(yīng)用是什么？
A2：產(chǎn)品主要應(yīng)用于高通量測(cè)序DNA///片段的純化和分選。對(duì)于PCR或者酶切DNA產(chǎn)物的純化也可以使用，可以有效去除dNTP，引物，引物二聚體，鹽離子等雜質(zhì)。
Q3：產(chǎn)品可以重復(fù)使用嗎？
A3：產(chǎn)品不可以重復(fù)使用，乙醇洗脫步驟將影響磁珠表面活性基團(tuán)性能。
Q4：與AMPure XP相比，怎么樣？
A4：我們的產(chǎn)品制備原材料*進(jìn)口，可以完美替代AMPure XP Beads。在使用方法，文庫(kù)大小分布和回收效率上，與AMPure XP Beads*一致，您可以直接按照AMPure XP Beads的操作方式使用，無(wú)需摸索條件。
Q5：DNA回收效率低。
A5：可能原因：DNA與磁珠比例不滿足分選要求；乙醇濃度低。80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配，放置時(shí)間過(guò)久，可能由于乙醇揮發(fā)，造成濃度降低，影響洗脫效果；洗脫溶液體積不足；洗脫溶液孵育時(shí)間過(guò)短；磁珠過(guò)度干燥。
建議：按照分選推薦比例添加磁珠；80%乙醇現(xiàn)用現(xiàn)配；洗脫溶液需*覆蓋磁珠；磁珠應(yīng)于洗脫液中按規(guī)定時(shí)間孵育，常規(guī)為5分鐘；切勿室溫干燥磁珠大于10分鐘，過(guò)度干燥將降低洗脫效率。
Q6：純化后DNA在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)不理想。
A6：由乙醇?xì)埩粢?/span>，可能是操作時(shí)磁珠分離時(shí)間過(guò)短或磁力器磁力較弱，洗脫步驟中吸取上清速度過(guò)快等。建議確保在后一步洗滌結(jié)束后，溶液中無(wú)殘留乙醇。磁珠可于室溫干燥5-10分鐘，使乙醇*干燥。
訂購(gòu)信息
名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 優(yōu)惠價(jià) |
Hieff NGS® DNA Selection Beads（Superior AMPure XP alternative） | 12601ES03/08/56/75 | 1/5/60/450 mL | 296/986/6286/26186 | 192/641/4086/17021 |
原價(jià)450ml，26186元 大包裝，更優(yōu)惠 | 1~5瓶，13500/瓶 6~10瓶，12000/瓶 11~20瓶，9800/瓶 21~50瓶，8000/瓶 51~100瓶，7000/瓶 （>100瓶，另議） | |||
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