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細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)是一種將外源DNA或RNA導(dǎo)入目標(biāo)細(xì)胞的過程，它在生命科學(xué)領(lǐng)域扮演著至關(guān)重要的角色。這一技術(shù)不僅促進(jìn)了基因表達(dá)研究、基因功能分析、信號傳導(dǎo)研究等領(lǐng)域的發(fā)展，而且在基因治療、疫苗開發(fā)和藥物篩選等方面展現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用前景。具體來說，細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)的應(yīng)用包括：
基因功能研究
基因敲除和沉默
腫瘤研究
疫苗生產(chǎn)
基因治療
藥物篩選
此外，細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)還涉及到miRNA和mRNA的研究與應(yīng)用。miRNA通過調(diào)節(jié)特定基因的表達(dá)，在細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞分化、免疫應(yīng)答、發(fā)育調(diào)節(jié)等過程中發(fā)揮作用，異常的miRNA表達(dá)與多種疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。而mRNA轉(zhuǎn)染作用則是指將體外合成的mRNA導(dǎo)入到細(xì)胞內(nèi)，利用細(xì)胞內(nèi)的翻譯系統(tǒng)將mRNA翻譯成目標(biāo)蛋白質(zhì)，這種技術(shù)在mRNA疫苗研發(fā)和mRNA藥物生產(chǎn)中具有重要應(yīng)用。
圖1.細(xì)胞轉(zhuǎn)染示意圖[1]
293細(xì)胞系，以其轉(zhuǎn)染效率和穩(wěn)定的外源基因表達(dá)特性，在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域占據(jù)核心地位。這些細(xì)胞系源自人類胚胎腎臟細(xì)胞，通過腺病毒DNA片段轉(zhuǎn)化而得到，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞的永生化。它們不僅在病毒載體的制備中發(fā)揮關(guān)鍵作用，尤其是在腺相關(guān)病毒、慢病毒的及重組蛋白的高效表達(dá)方面顯示出巨大潛力。廣泛應(yīng)用于基因治療、疫苗開發(fā)、藥物生產(chǎn)以及結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究等多個領(lǐng)域，成為現(xiàn)代生物技術(shù) 的工具。
到目前為止，根據(jù)不同的研究與生產(chǎn)需求，已經(jīng)人為地建立了許多HEK293細(xì)胞的亞型和衍生細(xì)胞系，主要有293T、293H、293F和293S四大分支。
圖2.HEK293細(xì)胞及其衍生細(xì)胞系起源[2]
293細(xì)胞系具有以下顯著特點(diǎn)：
高轉(zhuǎn)染效率：293細(xì)胞系對外源DNA具有較高的攝取率，這歸因于它們能夠表達(dá)某些促進(jìn)DNA進(jìn)入細(xì)胞的病毒基因。
易于培養(yǎng)及擴(kuò)增：293細(xì)胞生長迅速且相對容易維護(hù)，這對于需要快速且可靠結(jié)果的實(shí)驗(yàn)是有益的。
適應(yīng)性強(qiáng)：293細(xì)胞可以在多種條件下生長，包括貼壁或懸浮培養(yǎng)，這使得它們適合大規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)。
人源細(xì)胞系：作為人源細(xì)胞系，它們?yōu)槿祟惿飳W(xué)提供了更相關(guān)的生物學(xué)背景，這在治療研究中尤其重要，因?yàn)槿嗽醇?xì)胞的反應(yīng)可以預(yù)測體內(nèi)結(jié)果。
多功能性：它們能夠產(chǎn)生具有復(fù)雜翻譯后修飾的蛋白質(zhì)，這一特征對于許多蛋白質(zhì)（尤其是治療性抗體）的功能至關(guān)重要。
此外，293細(xì)胞系的多功能性延伸至復(fù)雜蛋白質(zhì)的生產(chǎn)，包括單克隆抗體、生物仿制藥及細(xì)胞與基因治療藥物，用于治療癌癥、自身免疫性疾病和其他疾病。它們精確折疊和修飾蛋白質(zhì)的能力使它們成為重組蛋白質(zhì)生產(chǎn)行業(yè)的shou選。因此，293細(xì)胞系不僅在基礎(chǔ)科研中發(fā)揮著重要作用，而且在生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)中也扮演著關(guān)鍵角色，特別是在疫苗、蛋白質(zhì)生產(chǎn)及病毒包裝中的作用不可忽視。
Hieff Trans® 293 Transfection Reagent 是一款專為293細(xì)胞系設(shè)計(jì)的高效轉(zhuǎn)染試劑，它不僅適用于HEK（人胚腎）293貼壁細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染，還兼容293F、Expi293F等多種293懸浮細(xì)胞系高密度轉(zhuǎn)染。此外，Hieff Trans®293 Transfection Reagent 的高效性體現(xiàn)在其能夠顯著提升293F細(xì)胞中的蛋白表達(dá)水平，以及病毒包裝產(chǎn)量，這對于需要大量重組蛋白的生產(chǎn)和病毒包裝研究至關(guān)重要。
應(yīng)用場景
抗體及重組蛋白表達(dá)
慢病毒LV及腺相關(guān)病毒AAV等病毒包裝
產(chǎn)品特征
適用于貼壁及懸浮293細(xì)胞系高密度生產(chǎn)
廣泛用于蛋白表達(dá)及病毒包裝
案例展示
在懸浮293F細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒，質(zhì)粒DNA：轉(zhuǎn)染試劑=1：2；結(jié)果顯示Hieff Trans® 293 Transfection Reagent 293專用轉(zhuǎn)染試劑在懸浮293F細(xì)胞上有很高轉(zhuǎn)染效率。
圖3.懸浮293F細(xì)胞轉(zhuǎn)染效果圖
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Hieff Trans®293 Transfection Reagent 293細(xì)胞專用轉(zhuǎn)染試劑 | 1 mL /10 mL /100mL | 40818ES03/10/60 |
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Hieff Trans® Ultra PEI-AAV Transfection Reagent轉(zhuǎn)染試劑 | 1 mL /10 mL /100mL | 40823ES03/10/60 |
Hieff Trans® Ultra PEI-AAV Transfection Reagent-GMP轉(zhuǎn)染試劑 | 10 mL /100mL/1L | 40824ES10/60/80 |
參考文獻(xiàn)：
[1] Guo X, Ma Y, Wang H, Yin H, Shi X, Chen Y, Gao G, Sun L, Wang J, Wang Y, Fan D. Status and developmental trends in recombinant collagen preparation technology. Regen Biomater. 2023 Nov 29;11:rbad106. doi: 10.1093/rb/rbad106. PMID: 38173768; PMCID: PMC10761200.
[2] Lin YC, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. Nat Commun. 2014;5:4767. Published 2014 Sep 3. doi:10.1038/ncomms5767
