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淋巴細(xì)胞分離液1.077

2014-10-20  閱讀(165)

分享:

Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴細(xì)胞分離液1.077

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

儲(chǔ)存

價(jià)格(元)

*(元)

Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴細(xì)胞分離液1.077

40503ES60

100ml

室溫

660.00

219.00

Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴細(xì)胞分離液1.077

40503ES76

5×100ml

室溫

1549.00

989.00

產(chǎn)品描述

淋巴細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium, LSM)是一種濾膜除菌的即用型分離液,用于體外分離人外周血淋巴細(xì)胞,也可以從其他組織中分離淋巴細(xì)胞,包括臍帶血和骨髓細(xì)胞等。

100ml包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸鈉。20℃下密度是1.0770-1.0800g/ml。

工作原理

用去纖維蛋白或肝素處理人血,以11的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,在分離溶液中分層,低速離心30min。離心過(guò)程中,由于差速遷移zui終形成不同的細(xì)胞層。

紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞,它們通過(guò)梯度遷移至管底。由于其密度不同,淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞(單核細(xì)胞和血小板)分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過(guò)吸取分界層溶液回收,zui后進(jìn)一步清洗去除血小板,LSM和血漿。

運(yùn)輸與保存方法

室溫運(yùn)輸、保存(15-30 °C)。

注意事項(xiàng)

1)         為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作;

  1. 稀釋去纖維蛋白血液或肝素化血液用的生理鹽水為無(wú)菌液體;
  2. 為保持淋巴細(xì)胞的活性,應(yīng)該采血后盡快進(jìn)行分離。分離細(xì)胞層實(shí)際上是單個(gè)核細(xì)胞層,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。

操作方法(用于去纖維蛋白或抗凝血?jiǎng)┨幚磉^(guò)的人體血液;對(duì)于其他物種或者其他組織的血液,需要對(duì)此程序做出一定的改進(jìn)

1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合;

2. 無(wú)菌條件轉(zhuǎn)移3 ml LSM15 ml離心管中;

3. 2 ml 生理鹽水混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液;

4. 小心將稀釋血液加入含有3 ml LSM(室溫)的15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中;

5. 室溫下400xg離心15-30min,離心可以沉淀紅細(xì)胞和多形核白細(xì)胞,同時(shí)可以在LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞,如下圖所示(分層情況從上到下依次為血漿層-單個(gè)核細(xì)胞層-LSM-RBC顆粒);

6. 吸出淋巴細(xì)胞層上方2-3mm的血漿;

7. 吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM層,并轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細(xì)胞層中,室溫(18-25°C)離心10分鐘,離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞的范圍,例如160 – 260 xg(清洗去除LSM,并降低血小板的百分比);

8. 再用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,zui后取適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基(實(shí)驗(yàn)者所用)重懸細(xì)胞。


 

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