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Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴細(xì)胞分離液1.077
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格（元） | *（元） |
Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴細(xì)胞分離液1.077 | 40503ES60 | 100ml | 室溫 | 660.00 | 219.00 |
Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴細(xì)胞分離液1.077 | 40503ES76 | 5×100ml | 室溫 | 1549.00 | 989.00 |
產(chǎn)品描述
淋巴細(xì)胞分離液(Lymphocyte Separation Medium, LSM)是一種濾膜除菌的即用型分離液，用于體外分離人外周血淋巴細(xì)胞，也可以從其他組織中分離淋巴細(xì)胞，包括臍帶血和骨髓細(xì)胞等。
每100ml包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸鈉。20℃下密度是1.0770-1.0800g/ml。
工作原理
用去纖維蛋白或肝素處理人血，以1：1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，在分離溶液中分層，低速離心30min。離心過程中，由于差速遷移zui終形成不同的細(xì)胞層。
紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞，它們通過梯度遷移至管底。由于其密度不同，淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞（單核細(xì)胞和血小板）分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過吸取分界層溶液回收，zui后進(jìn)一步清洗去除血小板，LSM和血漿。
運(yùn)輸與保存方法
室溫運(yùn)輸、保存（15-30 °C）。
注意事項(xiàng)
1) 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；
- 稀釋去纖維蛋白血液或肝素化血液用的生理鹽水為無菌液體；
- 為保持淋巴細(xì)胞的活性，應(yīng)該采血后盡快進(jìn)行分離。分離細(xì)胞層實(shí)際上是單個(gè)核細(xì)胞層，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。
操作方法（用于去纖維蛋白或抗凝血?jiǎng)┨幚磉^的人體血液；對(duì)于其他物種或者其他組織的血液，需要對(duì)此程序做出一定的改進(jìn)）
1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合；
2. 無菌條件轉(zhuǎn)移3 ml LSM到15 ml離心管中；
3. 用2 ml 生理鹽水混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液；
4. 小心將稀釋血液加入含有3 ml LSM（室溫）的15ml離心管中，在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中；
5. 室溫下400xg離心15-30min，離心可以沉淀紅細(xì)胞和多形核白細(xì)胞，同時(shí)可以在LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞，如下圖所示（分層情況從上到下依次為血漿層-單個(gè)核細(xì)胞層-LSM層-RBC顆粒）；
6. 吸出淋巴細(xì)胞層上方2-3mm的血漿；
7. 吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM層，并轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細(xì)胞層中，室溫（18-25°C）離心10分鐘，離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞的范圍，例如160 – 260 xg（清洗去除LSM，并降低血小板的百分比）；
8. 再用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞，zui后取適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基（實(shí)驗(yàn)者所用）重懸細(xì)胞。
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