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40762ES75iFluor™ 647標記鬼筆環(huán)肽（遠紅）
| 參考價 | ￥1858 |
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 40762ES75 型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
規(guī)格
| 300t | 1858元 | 99 件 可售 |
訪問次數(shù)：2028更新時間：2023-12-11 18:18:04
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
產(chǎn)品介紹
HB170919
iFluor™ 647標記鬼筆環(huán)肽（遠紅）iFluor™ 647 phalloidin
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
iFluorTM 647 phalloidin iFluor™ 647標記鬼筆環(huán)肽（遠紅） | 40762ES75 | 300 T | -20℃避光保存 | 1858.00 |
背景描述
鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）的環(huán)狀七肽毒素，以高親和力（Kd= 20 nM）選擇性結(jié)合于絲狀肌動蛋白F-actin，而不會與單體肌動蛋白G-actin結(jié)合，通常用來標記組織切片、細胞培養(yǎng)物或無細胞體系中的F-actin，從而對F-actin進行定性和定量分析。另外，鬼筆環(huán)肽衍生物也以相近的親和力結(jié)合于大小纖維，無論是動植物來源的肌肉細胞或非肌肉細胞，按照每一個肌動蛋白亞基約與一個鬼筆環(huán)肽分子的計量比結(jié)合。且非特異性結(jié)合幾乎可忽略，染色區(qū)域和非染色區(qū)域辨識度非常明顯。因此，鬼筆環(huán)肽衍生物特別適合替代肌動蛋白（Actin）抗體進行相關(guān)研究。另外鬼筆環(huán)肽衍生物很小，直徑約12-15?，分子量＜2000 Daltons，未標記肌動蛋白（Actin）的許多生理特性都得以維持，比如，同肌動蛋白結(jié)合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能發(fā)生反應(yīng)；鬼筆環(huán)肽標記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質(zhì)；以及甘油抽提的肌纖維標記后仍可收縮等。
鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）的結(jié)合阻止絲狀肌動蛋白（微絲）的解離，穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu)，從而破壞微絲的聚合-去聚合的動態(tài)平衡。此特性使得肌動蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度（CC）降至＜1 µg/mL，因此，可用作一種聚合促進劑。此外，鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品為iFluorTM 647標記的鬼筆環(huán)肽，具有高亮度和光穩(wěn)定性，且染色反應(yīng)特異性強，對比性高，具有比Actin抗體更好的染色效果，適合用作F-actin的定性和定量檢測。iFluorTM 647鬼筆環(huán)肽染色與用于細胞分析的其他熒光染色*兼容，包括熒光蛋白、Qdot® 納米晶體和其他iFluorTM偶聯(lián)物（包含iFluorTM偶聯(lián)二抗）。另外，經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性。且本品的結(jié)合沒有物種差異性，適用性廣泛。
產(chǎn)品性質(zhì)
分子量（Molecular Weight） | ～2200 |
zui大激發(fā)/發(fā)射波長（Ex/Em） | 650/665 nm |
溶解性（Solubility） | 溶于DMSO |
結(jié)構(gòu)式（Structure） |
|
運輸與保存方法
冰袋運輸。收到貨后-20℃避光干燥保存，1年有效。
注意事項
鬼筆環(huán)肽具有毒性，需小心操作（對人的半數(shù)致死劑量LD50約2 mg/kg）。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
需要自備材料
1）1×PBS緩沖液， pH 7.4，細胞培養(yǎng)級別（貨號：60145ES76）
2）固定液4%多聚甲醛（不含甲醇）（溶于PBS緩沖液）（貨號：36314ES60）
3）透化液Triton X-100（溶于PBS緩沖液）
4）BSA，標準級別（貨號：36101ES25）
5）DAPI染液（即用型）（貨號：40728ES50）
操作步驟
1染色液的配置
1) 母液的配置：使用前將本品回溫至室溫并簡短離心，加入30 μL DMSO使其充分溶解，混勻即可獲得1000×iFluorTM 647標記鬼筆環(huán)肽母液。根據(jù)實驗情況，對其分裝并于-20℃避光干燥保存。
2) 工作液的配置：吸取1 µL1000×iFluorTM 647標記鬼筆環(huán)肽母液至1 mL PBS（含1%BSA）緩沖液中即可得到1×工作液。
【注】：不同的細胞染色狀況不同，相應(yīng)iFluorTM 647鬼筆環(huán)肽使用量也需根據(jù)不同情況而定。
2. 染色步驟
1）細胞培養(yǎng)過夜或更長，使其密度達到50-60%匯合度。
2）吸掉培液，37℃預(yù)熱的1×PBS（pH 7.4）清洗細胞2次。
3）使用溶于PBS的4%進行細胞固定，室溫固定10-30 min。
【注】：避免固定劑中含有甲醇成分，因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。
4） 室溫條件下，用PBS清洗細胞2~3次，每次10 min。
（可選）：室溫條件下，用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化處理3-5 min，從而增加其通透性。
5）室溫條件下，用PBS清洗細胞2~3次，每次10 min。
6） 取足夠量新鮮配好的 iFluorTM 647標記鬼筆環(huán)肽工作液以覆蓋住細胞，如：100 µL/孔（96孔板），室溫避光染色20-90 min。
7）用PBS清洗細胞3次，每次5 min。
（可選）：加入足量的即用型DAPI溶液對細胞核進行復(fù)染，如：100 µL/孔（96孔板），室溫3~5 min。用PBS清洗細胞2次，每次5 min。
8）于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察，選擇iFluorTM 647激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=650/665 nm）和/或DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=364/454 nm）。
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