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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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20403ES80rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 20403ES80 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：995更新時間：2022-04-11 16:53:46
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1000U |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 20403ES80 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶 | 20403ES80 | 1000 U | ≤-20℃ | 215.00 |
rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶 | 20403ES92 | 10 ×1000 U | ≤-20℃ | 1595.00 |
rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶 | 20403ES10 | 10 KU | ≤-20℃ | 1355.00 |
rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶 | 20403ES50 | 50 KU | ≤-20℃ | 5425.00 |
產(chǎn)品描述
rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶，不僅保持天然TEV酶的功能活性，且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更強(qiáng)的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶，具有很強(qiáng)的位點特異性，嚴(yán)格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位點在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30℃時可達(dá)到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和溫度4-30℃的廣泛范圍內(nèi)皆有活性（見表1），使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His標(biāo)簽，通過Ni-NTA樹脂去除，以達(dá)到純化目的蛋白的目的。
表1. 不同溫度下rTEV酶切活性
反應(yīng)時間（h） | 不同溫度下剪切活性（%） | |||
4℃ | 16℃ | 21℃ | 30℃ | |
1 | 34 | 58 | 56 | 70 |
2 | 58 | 80 | 78 | 90 |
3 | 71 | 99 | 99 | 99 |
3.5 | 84 | 99 | 99 | 99 |
產(chǎn)品性質(zhì)
來源（Source） | 大腸桿菌 |
外觀（Appearance） | 無色透明液體 |
比活力（Specific Activity） | 5 U/μL |
活性定義（Unit Definition） | 在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH 8.0，0.5 mM EDTA，1 mM DTT）中，30℃反應(yīng)1 h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。 |
純化（Purification） | Ni柱親和純化 |
純度（Purity） | ≥95%（by SDS-PAGE） |
產(chǎn)品組分
編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品貨號/規(guī)格 | |||
20403ES80/1000 U | 20403ES92/10×1000 U | 20403ES10/10 KU | 20403ES50/50 KU | ||
20403-A | rTEV Protease（5 U/μL） | 200 μL | 10×200 μL | 2×1 mL | 10 mL |
20403-B | rTEV Buffer （10×） | 600 μL | 10×600 μL | 6 mL | 30 mL |
運輸與保存方法
冰袋運輸。
rTEV Buffer于-20℃保存，一年穩(wěn)定。rTEV Protease，-20℃保存，6個月穩(wěn)定；-80℃長期保存，一年穩(wěn)定。建議收到貨或者第一次使用時分裝各組分保存，避免反復(fù)凍融。
應(yīng)用實例
1. 在EP管中配制如下反應(yīng)體系。
組分 | 用量 |
融合蛋白 | 40 μg |
rTEV Protease (5 U/μL) | 4 μL |
rTEV buffer（10×） | 15 μL |
DDW（超純水） | up to 150 μL |
2. 30℃孵育，在1、2、4、6小時分別吸出30 μL上述反應(yīng)液，置于單獨的EP管中。
3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。
4. 樣品全部反應(yīng)完畢后，樣品煮沸5 min，取40 μL進(jìn)行SDS-PAGE分析。確定最佳反應(yīng)時間。如融合蛋白要求低溫處理，可將反應(yīng)液置于4℃，延長反應(yīng)時間，并增加rTEV酶用量，以保證酶切效果。
注意事項
1. 影響天然TEV酶活性的常見因素：1）PMSF和AEBSF（1 mM），TLCK（1 mM），Bestatin（1 mg/mL），EDTA（1 mM），Pestatin A（1 mM）以及E-64（3 mg/mL），而rTEV可兼容上述抑制劑；2）Zn離子濃度（>5 mM），同樣對rTEV活性有抑制；3）與半胱氨酸反應(yīng)的試劑，也是rTEV的潛在抑制劑。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途！
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HB211109
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