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- 19221ES50 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):403更新時間:2024-09-04 17:26:02
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
---|---|---|---|
貨號 | 19221ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit
產(chǎn)品描述
MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit采用MolPure® DNA清除/RNA吸附通用柱技術(shù)和和新型的溶液體系,適用于從多種新鮮或凍存的動物組織或培養(yǎng)細(xì)胞中高效率提取高純度、高質(zhì)量的總RNA。提取過程不需要用到有毒的酚、氯仿、β-巰基乙醇等有機(jī)溶劑,也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀。操作簡便,15 min即可完成動物組織或細(xì)胞(10-30 mg動物組織或 (1-10)×106個動物細(xì)胞)總RNA的提取。試劑盒內(nèi)的MolPure® DNA清除/RNA吸附通用柱可輕松過濾除去基因組DNA和高效吸附RNA。提取的總RNA純度高,可用于RT-PCR、qPCR、分子克隆和RNase保護(hù)分析等多種分子生物學(xué)實驗。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分名稱 | 19221ES08 (5 T) | 19221ES50 (50 T) |
19221-A | DNA清除/RNA吸附通用柱(MolPure® DNA removing/RNA binding Column A2) | 10個 | 100個 |
19221-B | 2 mL收集管 (2 mL Collection Tube A2) | 10個 | 100個 |
19221-C | 裂解液LB (LB Buffer A2) | 3 mL | 30 mL |
19221-D | 去蛋白液PL (PL Buffer A2) | 4 mL | 40 mL |
19221-E | 結(jié)合液BD* (BD Buffer A2*) | 1 mL | 10 mL |
19221-F | 漂洗液W* (Wash Buffer A2*) | 1.3 mL | 13 mL |
19221-G | RNase-free H2O | 1 mL | 5 mL |
運(yùn)輸和保存方法
常溫運(yùn)輸。室溫避光保存,有效期24個月。2-8℃可保存更長時間。
注意事項
1. 避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊蓋子。
2. 注意觀察各溶液是否有析出或渾濁(尤其冬季等室溫為低溫環(huán)境時),可37℃溫浴復(fù)溶至溶液澄清,避免影響使用效果。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
4. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
實驗前準(zhǔn)備
1. 自備設(shè)備和試劑:臺式離心機(jī)、水浴鍋或金屬浴,1.5 mL RNase-free離心管,液氮,無水乙醇等。
2. 本試劑盒可以抑制RNase活性,不需要低溫離心,所有的離心步驟常溫進(jìn)行。
3. 使用前,在結(jié)合液BD*(19221-E)瓶中加入標(biāo)簽量的無水乙醇(5 T/50 T分別加入2.4 mL/24 mL無水乙醇),充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。
4. 使用前,在漂洗液W*(19221-F)瓶中加入標(biāo)簽量的無水乙醇(5 T/50 T分別加入5.2 mL/52 mL無水乙醇),充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。
操作方法
一、樣本預(yù)處理
針對動物組織:新鮮組織(< 20 mg)加入350 μL裂解液LB,用玻璃勻漿器或電動勻漿器將組織研磨均勻。若用液氮研磨,需磨成細(xì)粉后再加入對應(yīng)量的裂解液LB,劇烈震蕩20 s,充分混勻。
針對貼壁細(xì)胞:不需消化,直接裂解;或離心收集細(xì)胞后,加入350 μL裂解液LB (< 5×106個細(xì)胞),用移液器反復(fù)吹打混勻(直到看不到細(xì)胞團(tuán)為止)。
針對懸浮細(xì)胞:直接離心收集細(xì)胞,加入350 μL裂解液LB (< 5×106個細(xì)胞),用移液器反復(fù)吹打混勻(直到看不到細(xì)胞團(tuán)為止)。
【注】:組織量20-30 mg加入600 μL裂解液LB
【注】:(5-10)×106個細(xì)胞加入600 μL裂解液LB
二、RNA提取
1. 將處理好的勻漿液加到DNA清除/RNA吸附通用柱上(柱子放在2 mL收集管內(nèi)),13,000 rpm離心1 min,收集含有RNA的濾液。
2. 精確估算濾液體積中加入等體積的結(jié)合液BD*(請先確認(rèn)已加入無水乙醇!),立即輕柔吹打混勻。
3. 將上述混合液全部加入新的DNA清除/RNA吸附通用柱中,13,000 rpm離心30 s,棄掉濾液。
4. 加入700 μL去蛋白液,室溫30 s,13,000 rpm離心30 s,棄掉濾液,將DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管中。
5. 加入500 µL漂洗液W*(請先確認(rèn)已加入無水乙醇!),13,000 rpm離心30 s,棄掉濾液。
6. 重復(fù)一遍步驟5,將DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管內(nèi)。
7. 空柱13,000 rpm離心2 min,除去殘留漂洗液W*。
8. 將DNA清除/RNA吸附通用柱放入新的1.5 mL RNase-free離心管中,在膜中央加入30-50 µL RNase-free H2O,室溫放置1 min,然后13,000 rpm離心1 min,收集濾液,即為RNA溶液。樣品可置于-80℃長期保存。
【注】:可通過以下方式提高回收產(chǎn)量:①65℃預(yù)熱RNase-free H2O;②將RNA濾液再次上柱,室溫放置1 min后,洗脫。
HB230110