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參考價(jià): | 面議 |
- 12604ES24 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):470更新時(shí)間:2022-02-10 10:21:21
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- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 24T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 12604ES24 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module 快速DNA連接模塊 | 12604ES24 | 24 T | 3263.00 |
12604ES96 | 96 T | 10863.00 | |
12604ES98 | 960T | 87663.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module是針對(duì)Illumina®與MGI®高通量測(cè)序平臺(tái)文庫(kù)構(gòu)建專(zhuān)業(yè)設(shè)計(jì)的DNA連接模塊,其中最大的亮點(diǎn)為本產(chǎn)品采用一款我公司自主研發(fā)的高效連接酶Fast T4 DNA ligase。本產(chǎn)品可在雙鏈平末端DNA////片段或雙鏈3′-dA DNA////片段的兩端連接Illumina®與MGI®測(cè)序平臺(tái)適用的DNA接頭,具有連接效率高、簡(jiǎn)便、可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)勢(shì)。
本產(chǎn)品已與Hieff NGS® Ultima Endperp Mix(Cat#12605),2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification(Cat#12621)共同用于DNA文庫(kù)構(gòu)建,通過(guò)Illumina®高通量平臺(tái)測(cè)序驗(yàn)證其有效性。
本產(chǎn)品已與Hieff NGS® Ultima Endprep Mix(Cat#12605)、2×Ultima HF Amplification Mix for MGI®(Cat#13344)共同用于DNA文庫(kù)構(gòu)建,通過(guò)MGI®高通量平臺(tái)測(cè)序驗(yàn)證其有效性。
本產(chǎn)品中提供的所有試劑組分,都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量與功能驗(yàn)證,最高程度保障產(chǎn)品優(yōu)異性能與批間穩(wěn)定性。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品編號(hào) | 組分名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | ||
12604ES24 | 12604ES96 | 12604ES98 | ||
12604-A | Fast T4 DNA Ligase | 120 μL | 480 μL | 4.8 mL |
12604-B | 5×Fast Ligation Buffer | 480 μL | 2 × 960 μL | 2 × 9.6 mL |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。
-20℃保存,效期一年。
注意事項(xiàng)
1)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2)本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法
1. Adapter的質(zhì)量和使用濃度直接影響連接效率及文庫(kù)產(chǎn)量。Adapter用量過(guò)高可能會(huì)產(chǎn)生較多Adapter Dimer;用量較低可能會(huì)影響連接效率及文庫(kù)產(chǎn)量。表1列舉了使用本試劑盒,不同Input DNA量推薦的Adapter使用量。
表1 . 500 pg-1 μg Input DNA推薦的Adapter使用濃度
Input DNA | Adapter : Input DNA摩爾比 | Input DNA | Adapter : Input DNA摩爾比 |
1 μg | 10:1 | 50 ng | 100:1 |
500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
250 ng | 40:1 | 1 ng | 200:1 |
100 ng | 100:1 | 500 pg | 400:1 |
【注】:Input DNA摩爾數(shù)(pmol)≈ Input DNA質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長(zhǎng)度(bp)]。
2. 目前主流的合并法DNA建庫(kù)試劑盒,其末端修復(fù)和加A處理后一般不純化,直接進(jìn)行接頭連接。本試劑盒可與主流的商業(yè)化末端修復(fù)加A體系兼容,進(jìn)行接頭連接。反應(yīng)體系請(qǐng)參考如下配制,渦旋瞬離后置于20℃,反應(yīng)15分鐘即可。
表2 . Adapter Ligation體系
名稱(chēng) | 體積(μL) |
dA-tailed DNA | 60 |
5×Fast Ligation Buffer | 20* |
Fast T4 DNA Ligase | 5 |
DNA Adapter | X** |
ddH2O | To 100 |
【注】:*對(duì)于5×Fast Ligation Buffer,請(qǐng)上下顛倒、振蕩,充分混勻并瞬時(shí)后離心使用。
**根據(jù)自身需求加入適量的接頭。
【接頭添加計(jì)算舉例】:當(dāng)Input DNA為100 ng,Input DNA長(zhǎng)度為300 bp時(shí),接頭應(yīng)該添加多少?
第一步,計(jì)算Input DNA摩爾數(shù)。公式:Input DNA摩爾數(shù)(pmol)≈ Input DNA質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長(zhǎng)度(bp)];
Input DNA 摩爾數(shù)(pmol)=100÷(0.66×300)=0.5 pmol;
第二步,計(jì)算接頭添加摩爾數(shù)。根據(jù)注意事項(xiàng)三表2查詢(xún)接頭添加比例
根據(jù)表2,查得Input DNA 100ng時(shí)接頭添加比例100:1,則接頭添加摩爾數(shù)=100×0.5 pmol=50 pmol;
第三步,計(jì)算接頭添加體積。接頭濃度=15 μmol/L(如使用其他接頭,濃度需要依據(jù)其他接頭濃度參數(shù));
接頭添加體積=接頭添加摩爾數(shù)(50 pmol)÷接頭濃度(15 μmol/L)=3.34 μL(注:15 μmol/L=15 pmol/μL)
綜上,接頭可添加3.4 μL,加1.6 μL水補(bǔ)齊至5 μL。(注:接頭最大加入體積不超過(guò)5 μL)
HB210810