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- 20609ES76 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):527更新時間:2022-02-10 13:31:41
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 20609ES76 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
Human DiI-Oxidized Low Density Lipoprotein (Human DiI-Ox-LDL) 人源紅色熒光標記氧化型低密度脂蛋白 | 20609ES76 | 500μg | 4ºC避光 | 2255.00 |
產(chǎn)品描述
LDL是由極低密度脂蛋白(VLDL)轉(zhuǎn)變而來,主要功能是把膽固醇運輸?shù)饺砀魈幖毎?,運輸?shù)礁闻K合成膽酸,其可用于研究受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用過程,尤其是在動脈粥樣硬化等疾病中,其血漿來源的LDL可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。
氧化的LDL(Ox-LDL)是修飾LDL中的一類。修飾的LDL除包括氧化修飾的LDL外,還包括乙?;疞DL及丙二醛(MDA)、4-羥烯酸(4-HNE)直接結(jié)合的LDL,這些未經(jīng)氧化修飾而僅經(jīng)一般化學(xué)修飾的LDL稱為衍化的LDL。不同于衍化的LDL,Ox-LDL 的生理學(xué)*性表現(xiàn)在:1)在細胞生理功能影響上,Ox-LDL可誘發(fā)細胞毒性作用,影響花生四烯酸的代謝,抑制膽固醇酯化作用等,但衍化的LDL無上述效應(yīng);2)Ox-LDL消耗LDL內(nèi)源性抗氧化物質(zhì),使LDL上的維生素E含量下降,而MDA-LDL無上述效應(yīng);3)氧化修飾涉及脂質(zhì)過氧化反應(yīng),LDL中的PUFAs被氧化。MDA對LDL修飾,是直接和ApoB-100結(jié)合成希夫氏堿,脂質(zhì)過氧化反應(yīng)輕微;4)氧化LDL在氧化程度低時,ApoB降解;在氧化程度高時,ApoB又可發(fā)生再聚合。MDA對LDL的修飾,ApoB無降解、聚合反應(yīng)發(fā)生;5)Ox-LDL 產(chǎn)生的熒光峰波長為430nm,而MDA -LDL的熒光峰波長為460nm。Ox-LDL不經(jīng)LDL受體代謝,由清道夫受體識別、結(jié)合、內(nèi)吞飲入細胞并喪失正常的膽固醇代謝途徑,引起細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積,泡沫樣變。
LDL氧化修飾的方式有很多種,常見的有:1)細胞介導(dǎo)的LDL氧化修飾,又稱為生物氧化修飾的LDL。如內(nèi)皮細胞,巨噬細胞,單核細胞都具有此功能;2)過度金屬離子介導(dǎo)的LDL氧化修飾,如Ca2+,F(xiàn)e2+等;還有其他形式的氧化修飾,包括物理方法如紫外線,或過氧化物酶催化。
本品為紅色熒光標記的氧化型人源低密度脂蛋白(Human DiI-Ox-LDL),是標記熒光探針DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的Ox-LDL,可以標記血管內(nèi)皮細胞和巨噬細胞,可用來鑒定并分選這些細胞,以及用來研究不同細胞系對修飾化LDL的內(nèi)吞作用。我司提供的DiI-Ox-LDL,每個批次均經(jīng)過牛大動脈內(nèi)皮細胞和小鼠巨噬細胞的標記檢測來評估產(chǎn)品的標記特異性,從而保證結(jié)果的一致性。
YEASEN提供的Human DiI-Ox-LDL為無菌包裝,可以直接稀釋使用。除提供DiI-Ox-LDL,我們還提供不帶標記的Ox-LDL,Ac-LDL(乙?;揎棧┮约安唤?jīng)修飾的LDL等。
產(chǎn)品性質(zhì)
濃度(Concentration) | 0.8-3.0 mg/ml |
外觀(Appearance) | 乳狀液體 |
緩沖液組分(Buffer Components) | 0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4 |
運輸與保存方法
冰袋運輸。
4ºC無菌避光,收到貨后可穩(wěn)定保存6周。千萬不可凍存!使用時一定要無菌操作!
注意事項
1)本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定,建議即配即用;
2)長期貯存可能會有沉淀析出,屬于正?,F(xiàn)象,低速離心2 min去除沉淀即可使用;
3)LDL與LDL受體的結(jié)合需要Ca2+和Mn2+的參與,過量EDTA的存在會抑制其結(jié)合;
4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟
1)無菌條件下,將Human DiI-Ox-LDL用細胞培養(yǎng)基稀釋至20-40 µg/ml。
2)加入活細胞內(nèi),37℃培養(yǎng)3-6小時。
3)孵育結(jié)束,吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培養(yǎng)基,并用無探針的培養(yǎng)基洗幾次。
4)根據(jù)實驗需求用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。
a)熒光顯微鏡觀察
采用標準的羅丹明激發(fā):發(fā)射濾光片(或建議使用波長為:Ex/Em=549nm/565nm);若需要請使用含3%甲醛的PBS進行固定,切勿使用甲醇或丙酮固定,因Dil易溶于有機溶劑。注:需設(shè)陽性細胞以做對照。
b)細胞分選(流式細胞術(shù))
胰蛋白酶處理細胞或者加入EDTA制成單細胞懸液,選用合適的已標記純化細胞用作陰性和陽性對照,從而進行流式分選設(shè)門(gate)。(建議使用波長為Ex: 488/514/549nm; Em: 565nm)。
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