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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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36701ES59全能核酸酶檢測試劑盒
參考價(jià): 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 36701ES59 產(chǎn)品型號(hào)
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):1074更新時(shí)間:2023-03-15 09:01:39

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1kit
貨號(hào) 36701ES59 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
UltraNuclease(全能核酸酶),又稱非限制性核酸內(nèi)切酶、廣譜核酸酶;是一種來源于Serratia Marcescen的非特異性核酸內(nèi)切酶,可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割,將核酸*消化成2-5個(gè)堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸,能夠在非常廣泛的條件下(6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X-100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

UCF.ME® UltraNuclease ELISA Kit全能核酸酶檢測試劑盒

36701ES59

1 Kit(96 Tests)

 

產(chǎn)品描述

 

UCF.ME® UltraNuclease(全能核酸酶),又稱非限制性核酸內(nèi)切酶、廣譜核酸酶;是一種來源于Serratia Marcescen的非特異性核酸內(nèi)切酶,可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割,將核酸*消化成2-5個(gè)堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸,能夠在非常廣泛的條件下(6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X-100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解各種形式的(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀,天然或變性)DNA和RNA,廣泛用于去除生物制品中的核酸。后續(xù)也可以通過相應(yīng)的方法去除UCF.ME® UltraNuclease。

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫檢測(夾心ELISA)原理檢測變性與非變性的UCF.ME® UltraNuclease全能核酸酶的殘留,用抗UCF.ME® UltraNuclease的兔多克隆抗體包被微孔板,形成固相抗體,向固相抗體微孔板中加入U(xiǎn)CF.ME® UltraNuclease標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣品,然后加入生物素(Biotin)標(biāo)記的Anti-UltraNuclease多抗,最后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(SA‐HRP),形成抗體+ 抗原+抗體‐Biotin+ SA‐HRP復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加入TMB底物顯色;TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色并在酸的作用下最終轉(zhuǎn)換成黃色,顏色的深淺與樣品中UCF.ME® UltraNuclease的量呈正相關(guān)。本試劑盒檢測定量范圍0.047-3 ng/mL;檢測下限:23.5 pg/mL。

 

運(yùn)輸與保存方法

 

冰袋(wet ice)運(yùn)輸。4℃保存,未開包裝的產(chǎn)品,一年有效。試劑打開后,有效期半年。千萬不可凍存。

配置好的試劑保存時(shí)間:1)稀釋后的洗滌緩沖液和稀釋緩沖液,4℃保存,有效期1周;2)標(biāo)準(zhǔn)品36701-C為液體,保存于4℃,有效期1年;3)配制好的檢測抗體、終止緩沖液,4℃保存,有效期1個(gè)月。

 

注意事項(xiàng)

 

1)試劑盒需在保質(zhì)期內(nèi)使用完畢。

2)禁止不同批次的相關(guān)試劑進(jìn)行混用。

3)本產(chǎn)品僅能夠應(yīng)用于檢測說明書中標(biāo)注的靶點(diǎn)抗原與樣本。其它應(yīng)用需經(jīng)使用者設(shè)計(jì)驗(yàn)證后,根據(jù)結(jié)果評估使用的可靠性與準(zhǔn)確性。

4)本產(chǎn)品僅用于研究,不能用于臨床診斷或治療。

5)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

產(chǎn)品組分

 

組分編號(hào)

組分名稱

規(guī)格

36701-A

酶標(biāo)板

1 Plate

36701-B

Detection Antibody:Biotin-conjugated Rabbit Anti-UltraNuclease Antibodies

35 μL(0.2 mg/mL)

36701-C

Standard: UCF.ME® UltraNuclease

1 vial(500 ng/mL)

36701-D

HRP-conjugated Streptavidin

10 μL

36701-E

Dilution Buffer 1

45 mL

36701-F

20×Wash Buffer

50 mL

36701-G

Dilution Buffer 2

30 mL

36701-H

TMB

15 mL

36701-I

Stop Solution

10 mL

36701-J

封板膜

5片


使用說明

 

一、試劑準(zhǔn)備

使用前所有試劑組分以及待測樣本需要恢復(fù)室溫。

1×Wash Buffer配制:濃縮液平衡至室溫,充分溶解,不要有結(jié)晶?;靹?,取50 mL 20×Wash Buffer至超純水中,然后定容到1 L;具體配制體積,可按照每次使用量進(jìn)行配制。

2. Detection Antibody配制:使用10000 r離心20s,然后用Dilution Buffer 2將檢測抗體稀釋至工作液濃度0.5 μg/mL。

3. HRP-conjugated Streptavidin配制:使用10000 r離心20s,然后用Dilution Buffer 2以1:5000稀釋至工作濃度使用。

4. 標(biāo)準(zhǔn)品曲線的配制:準(zhǔn)備8個(gè)無菌的1.5 mL離心管,按照標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次進(jìn)行標(biāo)記。移取994 μL Dilution Buffer 1至標(biāo)記為3 ng/ml的離心管中,其余各管移取500 μL,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存液濃度計(jì)算3 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)移取的儲(chǔ)液體積,加至離心管中混勻,取500 μL至下一個(gè)標(biāo)記濃度的離心管中,混勻,進(jìn)行一系列2倍梯度稀釋標(biāo)品,起始最高濃度標(biāo)記3 ng/mL,低濃度為0.047 ng/mL,可按照下面的配制方法來進(jìn)行。每次試驗(yàn)均需制備相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,不同試劑盒以及不同時(shí)間的標(biāo)準(zhǔn)曲線不能混用。樣本測試時(shí),每個(gè)孔所需標(biāo)品量為100 μL,注意配制體積要高于所需體積,避免體積使用量不足。

1 UCF.ME® UltraNuclease標(biāo)準(zhǔn)品體系配制(酶標(biāo)儀檢測0.047-3 ng/mL)*

Vial

Dilution Buffer 1(μL)

500 ng/mL UCF.ME® UltraNuclease標(biāo)準(zhǔn)品體積(μL)

標(biāo)準(zhǔn)品終濃度(ng/mL)

A

994

6

3

B

500

500 A

1.5

C

500

500 B

0.75

D

500

500 C

0.375

E

500

500 D

0.188

F

500

500 E

0.094

G

500

500 F

0.047

H

300

0

0=Blank

二、實(shí)驗(yàn)方法

使用前所有試劑組分以及待測樣本需要恢復(fù)室溫。強(qiáng)烈建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品和待檢樣本進(jìn)行雙復(fù)孔測定。

1.試劑準(zhǔn)備:備好各種待測試劑、稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本。

2.標(biāo)條確定:計(jì)算待測樣本和標(biāo)準(zhǔn)品所需酶標(biāo)條,將酶標(biāo)條從鋁箔袋取出,剩余的酶標(biāo)條放回鋁箔袋中并封好袋口,低溫保存。

3.清洗酶標(biāo)板:用1×Wash Buffer(300 μL/孔)洗板三次,拍干酶標(biāo)板。洗板對試驗(yàn)結(jié)果有重要影響,確保最后一次拍板沒有洗液殘留。

4.孵育樣本:加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本,100 μL/孔,確保15 min內(nèi)完成點(diǎn)樣,37℃孵育1 h。

5.清洗酶標(biāo)板:棄去孔中液體,加入1×Wash Buffer(300 μL/孔)洗板五次,拍干酶標(biāo)板。

6. Biotin-conjugated檢測抗體孵育:將預(yù)先配制至工作濃度的檢測抗體加入酶標(biāo)板中,100 μL/孔,37℃孵育1 h。

7.清洗酶標(biāo)板:棄去孔中液體,加入1×Wash Buffer(300 μL/孔)洗板五次,拍干酶標(biāo)板。

8. HRP-conjugated Streptavidin孵育:將預(yù)先配制至工作濃度的偶聯(lián)HRP親和素加入酶標(biāo)板中,100 μL/孔,37℃孵育40 min。

9.清洗酶標(biāo)板:棄去孔中液體,加入1×Wash Buffer(300 μL/孔)洗板五次,拍干酶標(biāo)板。

10.顯色:使用10 min將底物液恢復(fù)至室溫,將底物液TMB加入酶標(biāo)板中,100 μL/孔,37℃避光孵育15 min。

11.終止:加入50 μL/孔終止液至酶標(biāo)板中,輕輕震動(dòng)酶標(biāo)板至顯色均勻。

12.讀值:20 min內(nèi)讀取450 nm的光吸收值。

二、結(jié)果分析

1. 如果待測樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD值,需將樣本進(jìn)行稀釋后重新測定。

2. 曲線制定:根據(jù)UCF.ME® UltraNuclease全能核酸酶標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度(減去標(biāo)準(zhǔn)品中空白孔的OD值即最終的讀數(shù),也可以不用減去空白孔的OD值)采用二次曲線回歸擬合,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(X-標(biāo)準(zhǔn)品濃度ng/mL;Y-最終的OD450 nm),推薦使用ELISACalc.exe回歸/擬合計(jì)算軟件。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品的稀釋倍數(shù)計(jì)算樣品中全能核酸酶濃度。


附件1:標(biāo)準(zhǔn)品配置流程簡圖

image.png 

附件2:示例數(shù)據(jù)

以下標(biāo)準(zhǔn)曲線圖僅供參考,應(yīng)以同次實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本含量

image.png 


附件3:實(shí)驗(yàn)步驟流程簡圖

image.png


相關(guān)產(chǎn)品

 

名稱

貨號(hào)

規(guī)格

UCF.ME® UltraNuclease 全能核酸酶

20156ES25

25 KU

20156ES50

50 KU

20156ES60

100 KU

UCF.ME® UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶

20157ES25

25 KU

20157ES50

50 KU

20157ES60

100 KU

20157ES80

1 MU (1000 KU)

20157ES90

5 MU (5000 KU)

 

HB210907



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