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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 41207ES05 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Urine) 尿液外泌體快速抽提試劑盒Plus | 41207ES05 | 5 T | 1355.00 |
41207ES20 | 20 T | 3755.00 |
產品描述
Exosome（外泌體）是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂質雙分子層結構，存在于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中。Exosome攜帶有多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息，不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用，更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。
本試劑盒采用*的分離技術，可以快速從尿液中獲得大量完整的外泌體顆粒，適用于下游的細胞共培養(yǎng)、電鏡分析、Western Blot、熒光定量（qPCR）和高通量測序等應用。
產品組分
編號 | 組分 | 產品編號/規(guī)格 | |
41207E05 | 41207ES20 | ||
41207-A | Exosome isolation solution（Urine） | 25 mL | 100 mL |
41207-B | Exosome Buffer | 5 mL | 20 mL |
41207-C | 50 mL過濾柱 | 5個 | 20個 |
運輸和保存方法
室溫運輸，本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個月。
注意事項
1、使用前請將外泌體抽提試劑（41207-A）充分混勻。
2、產品只針對尿液樣本，不適用其它血清/血液或者是細胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提；如果需要進行細胞上清外泌體分離，請選用細胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。
3、如果想要進一步純化外泌體，可以使用相應抗體包被的磁珠進行親和純化。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5、本產品僅作科研用途！
操作方法
樣品預處理：
1、收集新鮮的樣品，置于冰上待用；若為凍存的樣品，可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍，待*融化后置于冰上待用。
2、取25 mL（單次樣品量不能低于25 mL）體液樣品轉移至離心管中，4℃，3000 × g離心10 min，棄沉淀（可多次離心至無明顯沉淀），并將上清轉移至過濾柱（41207-B）中。（可多次離心至無明顯沉淀）
3、將過濾柱轉移至離心機中，4℃，3000×g離心10min，取過濾柱收集管中的液體，轉移至新管中。
外泌體分離：
1、向預處理后的樣品中，按照下表加入Exosome isolation solution （其他樣品量根據(jù)表中試劑用量進行等比例變換）。
Urine | 41207-A 試劑用量 |
25 mL | 5 mL |
50 mL | 10 mL |
2、蓋緊離心管蓋，渦旋振蕩1 min，放置于4℃冰箱靜置2 h。
3、取出裝有混合液的離心管，4℃，10,000×g離心60 min，棄上清（盡可能吸凈上清液），收集富含外泌體的沉淀。
4、吸取一定量體積的Exosome Buffer溶液均勻吹打離心沉淀物，待其充分懸浮于Exosome Buffer后，將懸液轉移至新的1.5 mL離心管中。
【注】加入Exosome Buffer的量，建議根據(jù)初始樣本的體積決定，初始樣本體積：Exosome Buffer體積=50:1。
5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃，12,000×g離心5 min，棄沉淀，保留上清液，該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
【注】此時如果依然可以看到明顯的沉淀，建議重復步驟5，多次離心至無明顯沉淀。
6）外泌體的保存：純化后的外泌體可于4℃保存3天，分裝后于-80℃ 長期保存，避免反復凍融。
外泌體除菌（可選）：
獲得的外泌體后期需要與細胞共培養(yǎng)，可以使用0.22 μm的濾器進行過濾除菌。初次嘗試時，外泌體濃度在10-100 μg/mL內做梯度摸索，選擇一個較為合適的條件。
HB220107
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