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參考價(jià): | ¥ 2155 |
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- 97055ES48 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 97055ES48 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是1982年Barde等首先在豬腦中發(fā)現(xiàn)的一種具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用的蛋白質(zhì),屬于NGF家族神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的成員,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中特定神經(jīng)元亞群分化和存活所必需的。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白家族由至少四種蛋白質(zhì)組成,包括NGF,BDNF,NT-3和NT-4/5。這些分泌的細(xì)胞因子被合成為前前肽,其被蛋白水解處理以產(chǎn)生成熟的蛋白質(zhì)。所有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子都有六個(gè)保守的半胱殘基,它們參與三個(gè)二硫鍵的形成,并且在氨基酸水平上都共享約55%的序列同源性。與NGF類似,生物活性BDNF被預(yù)測(cè)為非共價(jià)連接的同源二聚體。BDNF可以與低親和力細(xì)胞表面受體LNGFR結(jié)合,該受體也結(jié)合其他神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,如NGF,NT-3和NT-4。然而,BDNF通過高親和力細(xì)胞表面受體gp145/trkB發(fā)出信號(hào)來介導(dǎo)其神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)特性。
翌圣Human BDNF ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒,用于定量測(cè)定血清、血漿中的人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Human BDNF)。特異性抗人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 97055ES48 / 97055ES96 |
規(guī)格 | 48 T / 96 T |
檢測(cè)范圍 | 15.63-1000 pg/mL |
檢測(cè)方法 | 雙抗夾心法 |
檢測(cè)物種 | 人 |
檢測(cè)時(shí)長(zhǎng) | 4.5小時(shí) |
靈敏度 | 10.1 pg/mL |
稀釋線性 | 83 - 117% |
回收率 | 81 - 117% |
板內(nèi)差 | 5.5% |
板間差 | 9.6% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
靈敏度檢測(cè)
BDNF的低檢測(cè)限為10.1 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
精密度檢測(cè)
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定8次,評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)24次,評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
項(xiàng)目 | 板內(nèi)精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
8 | 8 | 8 | 24 | 24 | 24 | |
平均值 | 467.3 | 153.2 | 50.5 | 429.1 | 138.2 | 52.8 |
標(biāo)準(zhǔn)差 | 22.3 | 7.9 | 3.4 | 32.6 | 14.9 | 5.6 |
變異系數(shù)(%) | 4.8% | 5.2% | 6.7% | 7.6% | 10.8% | 10.5% |
回收率檢測(cè)
通過不同水平的BDNF添加于樣本中來測(cè)定回收率,其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍(%) |
血清 | 90.7 | 82-99.6 |
血漿 | 103.7 | 97.7-116.6 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 | 98.3 | 80.5-113.3 |
稀釋線性檢測(cè)
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 97.1 | 87.3-103.5 |
1:04 | 97.9 | 92.2-104.1 |
1:08 | 103.1 | 88.6-115 |
1:16 | 100.4 | 88.6-115.4 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 107.1 | 97.3-116.9 |
1:04 | 101.4 | 94.3-108.9 |
1:08 | 100.5 | 86.5-116.8 |
1:16 | 108.2 | 92.5-116.6 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 97.1 | 90.3-100.8 |
1:04 | 98.6 | 96.7-101.8 |
1:08 | 91.4 | 86.5-100.5 |
1:16 | 88.4 | 82.7-99.4 |
樣本值
應(yīng)用本試劑盒,檢測(cè)若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數(shù)目 | 平均值(pg/mL) | 樣本值(pg/mL) |
血清 | 8 | 17.5 | 7.9-29.4 |
血漿 | 8 | 12.7 | 3.8-23.2 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 | 4 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得15.63 pg/mL
測(cè)定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: | ||
IL-1α | CNTF | IL-1β | β-NGF |
IL-1β | β-NGF | IL-2 | NGF R |
IL-2 | NGF R | IL-4 | NT-4 |
IL-4 | NT-3 | IL-6 | TrkB |
IL-5 | NT-4 | IL-10 | TrkC |
IL-6 | TrkA | IL-12 | |
IL-8 | TrkB | ||
IL-10 | TrkC | ||
IL-12 |
檢測(cè)簡(jiǎn)圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標(biāo)曲不好 | 移液量不準(zhǔn)確 | 檢查移液器,按時(shí)校準(zhǔn),仔細(xì)操作,充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當(dāng) | ||
顯色值偏低 | 孵育時(shí)間太短 | 給予足夠的孵育時(shí)間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當(dāng) | 校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 | |
CV偏高 | 酶標(biāo)板清洗不當(dāng) | 使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機(jī),檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準(zhǔn)備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) | 按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |