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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年
13487ES4× Frag/Prime Buffer
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 13487ES 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：342更新時(shí)間：2025-02-07 13:21:54
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
|---|
產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品銜接Hieff NGS® Dual-mode RNA Library Prep Kit (Yeasen: Cat#12309ES)，替代其中的Frag/Prime buffer使用，用于RNA的片段化和一鏈cDNA合成步驟。Input RNA可以是total RNA，也可以是mRNA純化的產(chǎn)物、rRNA去除的產(chǎn)物等。由于在Cat#12309ES中直接使用1×Frag/Prime Buffer去洗脫mRNA純化或rRNA去除操作中所得的RNA，沒(méi)有額外的體積用于添加含RNA的溶液。若Input RNA已經(jīng)溶解于Nuclease free ddH2O中，可選擇本產(chǎn)品進(jìn)行RNA片段化或一鏈cDNA合成反應(yīng)。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 13487ES08 / 13487ES24 / 13487ES96/13487ES98 |
規(guī)格 | 8 T / 24 T / 96 T/ 1000 T |
組分信息
組分編號(hào) | 組分名稱 | 13487ES08 | 13487ES24 | 13487ES96 | 13487ES98 |
13487-A | 4 × Frag/Prime Buffer | 32 μL | 96 μL | 384 μL | 4 mL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用說(shuō)明
當(dāng)Input RNA不需要片段化處理時(shí)，請(qǐng)選擇方案A；當(dāng)Input RNA需要片段化處理時(shí)，請(qǐng)選擇方案B。
A1. 若Input RNA無(wú)需片段化處理，可結(jié)合Cat#12309ES試劑，按照表1直接配制第一鏈cDNA合成反應(yīng)體系。
表1 直接進(jìn)行第一鏈cDNA合成反應(yīng)體系
名稱 | 體積 (μL) |
Input RNA | 13 |
4×Frag/Prime Buffer | 4 |
Strand Specificity Reagent | 6 |
1st Strand Enzyme Mix | 2 |
Total | 25 |
A2. 使用移液器輕輕吹打混勻，瞬離將反應(yīng)液離心至管底，按照表2反應(yīng)程序于PCR儀中進(jìn)行一鏈合成反應(yīng)。一鏈合成產(chǎn)物可銜接Cat#12309ES進(jìn)行后續(xù)反應(yīng)。
表2 第一鏈cDNA合成反應(yīng)程序
溫度 | 時(shí)間 |
熱蓋 105°C | On |
25 °C | 10 min |
42°C | 15 min |
70°C | 15 min |
4°C | Hold |
B1. 若Input RNA需要進(jìn)行片段化處理，可按照3配制片段化體系進(jìn)行RNA片段化。
表3 片段化反應(yīng)體系
名稱 | 體積 (μL) |
Input RNA | 13 |
4×Frag/Prime Buffer | 4 |
Total | 17 |
B2. 使用移液器輕輕吹打混勻，瞬離將反應(yīng)液離心至管底，根據(jù)Input RNA的完整度和實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，參?/span>Cat#12309ES說(shuō)明書設(shè)置合適的片段化條件。
B3. 片段化產(chǎn)物進(jìn)行一鏈cDNA合成，按照表4配制一鏈cDNA合成反應(yīng)體系。
表4 第一鏈cDNA合成反應(yīng)體系
名稱 | 體積 (μL) |
Fragmented RNA | 17 |
Strand Specificity Reagent | 6 |
1st Strand Enzyme Mix | 2 |
Total | 25 |
B4. 使用移液器輕輕吹打混勻，瞬離將反應(yīng)液離心至管底，按照表2反應(yīng)程序于PCR儀中進(jìn)行一鏈合成反應(yīng)。一鏈合成產(chǎn)物可銜接Cat#12309ES進(jìn)行后續(xù)反應(yīng)。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
3. 請(qǐng)使用無(wú)RNase污染的耗材，并對(duì)實(shí)驗(yàn)區(qū)域定期進(jìn)行清理，推薦使用Thermo Fisher公司的RNAZapTM 高效核酸去除噴霧去除RNA酶污染。
4. Input RNA請(qǐng)溶于Nuclease free ddH2O，避免Mg2+的存在干擾片段化效果；Input RNA最大投入體積為13 μL，在進(jìn)行洗脫時(shí)請(qǐng)注意洗脫體積的選擇。
