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供應(yīng)簡介

REPOTMHNF4慢病毒報(bào)告基因主要用于檢測細(xì)胞中HNF4的轉(zhuǎn)錄活性、藥物研究以及基因過表達(dá)和RNAi的表型分析等。

詳細(xì)介紹

REPO^TMHNF4慢病毒報(bào)告基因是吉滿生物自主研發(fā)的用于檢測HNF4轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報(bào)告基因慢病毒顆粒。HNF4（Hepatocyte Nuclear Factor 4）是轉(zhuǎn)錄因子核受體超家族中的一員，參與肝細(xì)胞分化調(diào)控和維持肝細(xì)胞的生物學(xué)功能。HNF4α主要在消化系統(tǒng)、肝臟和腎臟表達(dá)，以及在白色脂肪組織和胰腺中也有少量的表達(dá)。HNF4α具有阻斷肝纖維化、肝硬化、肝癌的疾病進(jìn)程,改善肝臟功能的作用。另外,HNF4α在肝干細(xì)胞移植方面也發(fā)揮重要作用,提高肝細(xì)胞移植的成功率。

REPO^TMHNF4慢病毒報(bào)告基因主要用于檢測細(xì)胞中HNF4的轉(zhuǎn)錄活性、藥物研究以及基因過表達(dá)和RNAi的表型分析等。

pGMLVHNF4-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒載體的多克隆位點(diǎn)插入了多個(gè)HNF4結(jié)合位點(diǎn)，可以高靈敏度地檢測HNF4的激活水平。采用慢病毒作為報(bào)告基因的優(yōu)點(diǎn)在于它能夠感染多種難感染的細(xì)胞，比如原代細(xì)胞，干細(xì)胞，神經(jīng)元細(xì)胞等。而且慢病毒能夠?qū)⑼庠椿虿迦爰?xì)胞基因組內(nèi)，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

質(zhì)粒圖譜：

質(zhì)粒元件信息：

5'LTR	1-635
PBS （primer binding site）	636-653
Ψ （packaging signal）	685-822
RRE （Rev-response element）	1303-1536
cPPT （central polypurine tract）	2028-2151
HNF4response element	2191-2226
Luciferase	2292-3944
P_PGK（phosphoglycerate kinase promoter）	3974-4482
Puro^r（puromycin resistance gene）	4503-5102
WPRE（woodchuck posttranscriptional regulatory element）	5116-5707
3'LTR	5910-6546
PUC origin of replication	7689-7016
Amp^r	8830-7834

包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
GM-022022	REPO^TMHNF4慢病毒報(bào)告基因	50ul×4管；1×10e7TU/ml
-	說明書	-

使用說明：

HNF4報(bào)告基因慢病毒顆粒采用慢病毒轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞。用熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒進(jìn)行檢測。

注意事項(xiàng)：

1. 病毒操作時(shí)使用生物安全柜，如使用普通超凈工作臺(tái)操作病毒，請(qǐng)不要打開風(fēng)機(jī)。

2. 病毒操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時(shí)必須特別小心，不要產(chǎn)生氣霧或飛濺。如操作時(shí)超凈臺(tái)有病毒污染，立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養(yǎng)板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細(xì)胞感染情況時(shí)應(yīng)遵從以下步驟：擰緊培養(yǎng)瓶或蓋緊培養(yǎng)板。用70%乙醇清理培養(yǎng)瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗(yàn)臺(tái)前，用70%乙醇清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)。

5. 病毒操作完成后，用肥皂清洗雙手。

保存條件：

-80℃保存。（如保存時(shí)間過長，使用前請(qǐng)重新檢測病毒滴度）

參考文獻(xiàn)：

[1] Onica T, Nichols K, Larin M, Ng L, Maslen A, Dvorak Z, Pascussi JM, Vilarem MJ, Maurel P, Kirby GM.

Dexamethasone-mediated up-regulation of human CYP2A6 involves the glucocorticoid receptor and increased binding of hepatic nuclear factor 4 alpha to the proximal promoter.

Mol Pharmacol. 2008 Feb;73（2）:451-60. Epub 2007 Oct 31.

[2] Qadri I, Iwahashi M, Kullak-Ublick GA, Simon FR.

Hepatocyte nuclear factor （HNF） 1 and HNF4 mediate hepatic multidrug resistance protein 2 up-regulation during hepatitis C virus gene expression.

Mol Pharmacol. 2006 Aug;70（2）:627-36. Epub 2006 May 2.

[3] Møldrup A, Ormandy C, Nagano M, Murthy K, Banville D, Tronche F, Kelly PA.

Differential promoter usage in prolactin receptor gene expression: hepatocyte nuclear factor 4 binds to and activates the promoter preferentially active in the liver.

Mol Endocrinol. 1996 Jun;10（6）:661-71.

[4] Weber H, Holewa B, Jones EA, Ryffel GU.

Mesoderm and endoderm differentiation in animal cap explants: identification of the HNF4-binding site as an activin A responsive element in the Xenopus HNF1alpha promoter.

Development. 1996 Jun;122（6）:1975-84.

產(chǎn)品價(jià)格：

貨號(hào)	名稱	產(chǎn)地	規(guī)格	報(bào)價(jià)/元
GM-022022	Lentivirus HNF4 luciferase reporter 慢病毒報(bào)告基因顆粒	Genomeditech	50ul×4管； 1×10e7TU/ml	3200

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