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?新型疫苗和疾病療法研發(fā)中的病毒、病毒樣顆粒和病毒載體純化的需求越來(lái)越多，因此需要使用更高效的純化技術(shù)。與蔗糖或氯化銫梯度離心相比，離子交換層析法具有諸多的優(yōu)勢(shì)：處理量大、病毒產(chǎn)量、純度和感染性更高、處理時(shí)間顯著縮短等。

賽多利斯開(kāi)發(fā)的 Sartobind® 離子交換膜層析技術(shù)因?yàn)榫哂休^大孔隙可以讓目標(biāo)分子通過(guò)基質(zhì)進(jìn)行對(duì)流運(yùn)動(dòng)，而不是擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)。這樣就可以快速捕獲目標(biāo)（結(jié)合）并洗脫（解離），從而縮短循環(huán)時(shí)間。而且這種即用型膜層析的床體積更小，因而其對(duì)緩沖液的需求量也更低。產(chǎn)品形式上為了滿(mǎn)足科學(xué)家靈活多樣的需求，Vivapure 和 Sartobind® Lab 膜層析產(chǎn)品在設(shè)計(jì)之初就考慮到可通過(guò)離心、注射器、蠕動(dòng)泵或 FPLC 系統(tǒng)進(jìn)行驅(qū)動(dòng)。

基于以上原因，加上 Sartobind® Lab 對(duì)病毒顆粒沒(méi)有物理截留作用，因此對(duì)病毒純化效果非常理想。下面讓我們了解一下Sartobind® Lab 在皰疹病毒以及濃核癥病毒純化中的應(yīng)用情況：

1、使用 Sartobind® Lab S 100 純化皰疹病毒

純化條件和步驟見(jiàn)表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大多數(shù)傳染性偽狂犬病病毒 Kaplan 株 (PrV-Ka)和缺乏糖蛋白 gD (PrV-gD-Pass) 、以及牛皰疹病毒1(BHV-1) 是在 MES 緩沖液中用 400 mM KCl 洗脫后發(fā)現(xiàn)的。且超過(guò) 85% 的病毒在單一餾分中被洗脫（表2）。

表1. PrV和BHV-1的純化條件

表2. 陽(yáng)離子交換層析后PPrV和BHV-1的收率

2、使用 Sartobind® Lab 純化濃核癥病毒

陰、陽(yáng)離子交換層析膜均可以用來(lái)結(jié)合病毒顆粒，具體使用哪一種要由進(jìn)料 pH 決定（表3）。本實(shí)驗(yàn)中Q柱有最佳的純化效果。且結(jié)果顯示，Sartobind® 沒(méi)有尺寸排除效應(yīng)，這表明膜層析柱是捕獲大病毒的不錯(cuò)之選。

表3.Sartobind®Lab Q、D和S的濃核癥病毒結(jié)合能力

互動(dòng)有禮

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