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在更換為其他流動(dòng)相體系之前，務(wù)必確保流動(dòng)相的兼容性。請(qǐng)用至少10倍柱體積的流動(dòng)相平衡色譜柱（色譜柱體積請(qǐng)參見(jiàn)表1）。
當(dāng)色譜柱達(dá)到恒定背壓時(shí)，可認(rèn)為該柱已達(dá)到熱力學(xué)平衡。
表1.不同規(guī)格色譜柱柱體積(mL)（乘以 10得到?jīng)_洗色譜柱所用的流動(dòng)相體積）
為了避免流動(dòng)相緩沖鹽在色譜柱或系統(tǒng)中發(fā)生析出，請(qǐng)使用5倍柱體積的水/有機(jī)溶劑混合溶液沖洗色譜柱，其中有機(jī)溶劑比例應(yīng)與所需緩沖鹽流動(dòng)相中的有機(jī)溶劑比例相同或更低。（例如，引入60%甲醇/40%緩沖鹽流動(dòng)相之前，應(yīng)使用60%甲醇水溶液沖洗色譜柱和系統(tǒng)。）
對(duì)于采用BEH HILIC填料的色譜柱，用50倍柱體積的50:50乙腈:水溶液（含最終濃度為10 mM的緩沖鹽）進(jìn)行沖洗。對(duì)于采用BEH Amide填料的色譜柱，用50倍柱體積的60:40乙腈:水溶液進(jìn)行沖洗。進(jìn)第一針樣品前，用20倍柱體積的流動(dòng)相（初始條件）平衡色譜柱（色譜柱體積請(qǐng)參見(jiàn)表1）。請(qǐng)參閱“BEH HILIC色譜柱入門"或“Amide色譜柱入門"獲取詳細(xì)信息。
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