英文名稱： DTNB
中文名稱： 5,5'-二硫雙(2-硝基苯甲酸)
MF： C14H8N2O8S2
MW： 396.35
CAS： 69-78-3

 DTNB為Ellman試劑。它用于比色法測定生物樣 品中巰基。它易溶于水。在巰基化合物的存在下，無色的DTNB將被轉(zhuǎn)變成黃  色的5-巰基-2-硝基苯甲酸。由于5-巰基-2-硝基苯甲酸在412 nm處具有zui大吸收，DTNB的吸收光譜并不干擾巰基的測定。   

配置方法：

    準(zhǔn)確稱取0.198gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配制成50ml溶液，存放于棕色瓶中，于暗處低溫保存?zhèn)溆?。?yīng)該注意的是配置緩沖、濃度，儲(chǔ)存時(shí)要避免見光。

應(yīng)用舉例：

    半胱氨酸中自由巰基的定量檢測方法

一、試劑的配制：

1、Tris－HCL緩沖液（0.25M）：DDW準(zhǔn)確配制后，用鹽酸調(diào)節(jié)pH＝8.3；

2、半胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1mM）：準(zhǔn)確稱取0.017563gL－半胱氨酸（175.63），用1ml甲酸溶解，以DDW定容至100ml；

3、DTNB（分子量：396.35）標(biāo)準(zhǔn)溶液（10mM）：準(zhǔn)確稱取0.198175gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配制成50ml溶液，存放于棕色瓶中，于暗處低溫保 存?zhèn)溆?/P>

4、DTNB分析溶液（0.1mM）：由1體積10mMDTNB標(biāo)準(zhǔn)液加99體積0.25M的Tris緩沖液配制而成，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作;

1、25℃條件下，用Tris緩沖液稀釋半胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)液配成梯度的稀釋液（5.0ml）， 其濃度分別為：0.00mM、0.025mM、0.05mM、0.1mM、0.15mM、0.2mM；

2、取上述各濃度溶液1ml分別加入到5ml預(yù)先恒溫于25℃水中的DTNB分析溶液，搖勻，準(zhǔn)確靜止10min，立即于波長412nm處測定吸光度值（A）。

根據(jù)目的蛋白的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出對應(yīng)的濃度即可

Product Name:DTNB

Product Number:D8130

Product Brand:Sigma

CAS Number:69-78-3