MTT法和CCK-8法細(xì)胞活性檢測及CCK-8試劑盒*

MTT法細(xì)胞活性檢測方法簡介

MTT法------什么是MTT法?

MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。MTT法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、細(xì)胞增殖測定、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測定等。MTT法的特點(diǎn)是靈敏度高、價(jià)格經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。不過，MTT法是有缺陷的，是因?yàn)镸TT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被溶解后才能檢測。這不僅使檢測時(shí)的工作量增加，也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲瓚的有機(jī)溶劑對(duì)實(shí)驗(yàn)者也有損害。

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CCK-8法(或稱WST-8法)細(xì)胞活性檢測方法簡介

CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑中含有WST-8，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽]，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓*（1-Methoxy PMS）的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazan）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞增殖試驗(yàn)、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及藥敏試驗(yàn)等。CCK-8法的優(yōu)點(diǎn)： 1、使用方便，省去了洗滌細(xì)胞，不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑； 2、CCK-8法能快速檢測； 3、CCK-8法的檢測靈敏度很高，甚至可以測定較低細(xì)胞密度； 4、CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法； 5、CCK-8法對(duì)細(xì)胞毒性小； 6、CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑中為1瓶溶液，毋需預(yù)制，即開即用。  CCK-8法的缺點(diǎn): 1、與MTT法相比，CCK-8和XTT的價(jià)格比較貴。 2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。

CCK-8法和MTT法比較研究的文獻(xiàn)參考

請(qǐng)點(diǎn)擊查看>>> CCK-8法和MTT法檢測人前列腺癌PC3細(xì)胞活性的*條件比較研究

參考文獻(xiàn)摘要：以人前列腺癌PC3細(xì)胞作為研究對(duì)象，探討了CCK-8法和MTT法的*實(shí)驗(yàn)條件。CCK-8的*檢測波長為450 nm，*檢測時(shí)間為加入CCK-8試劑后4 h，適宜細(xì)胞數(shù)量范圍為8×102-1×105個(gè)。在檢測抗腫瘤藥物阿霉素(ADM)對(duì)PC3細(xì)胞的增殖影響實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)CCK-8法測得數(shù)據(jù)的線性相關(guān)性優(yōu)于MTT法，并且數(shù)據(jù)偏差較MTT法小。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明CCK-8法較MTT法檢測的靈敏度高，準(zhǔn)確性好，是一種優(yōu)于MTT法的檢測細(xì)胞增殖活性的方法。

請(qǐng)點(diǎn)擊查看>>> MTT法和CCK-8法檢測細(xì)胞活性之測試條件比較

參考文獻(xiàn)摘要：利用HL60作為研究對(duì)象，對(duì)比了MTT法和CCK-8法在*檢測時(shí)刻和檢測波長等參數(shù)的差異。對(duì)于CCK-8法，*測試時(shí)刻在細(xì)胞液培養(yǎng)4 h后，*測試波長為490 nm。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用CCK-8法檢測的OD值與活細(xì)胞數(shù)的線性相關(guān)度要優(yōu)于MTT法，是一種靈敏度較高、重復(fù)性好的的細(xì)胞活性檢測方法。

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CCK-8法和MTT法的區(qū)別

Cell Counting Kit-8（CCK-8試劑盒）產(chǎn)品訂購信息

   品牌               貨號(hào)                     產(chǎn)品名稱                      包裝規(guī)格          *格         貨期
DOJINDO      CK04-500        Cell Counting Kit-8 試劑盒        500 Tests          998元           現(xiàn)貨
DOJINDO      CK04-1000      Cell Counting Kit-8 試劑盒       1000 Tests         1668元          現(xiàn)貨
DOJINDO      CK04-3000      Cell Counting Kit-8 試劑盒       3000 Tests          請(qǐng)?jiān)儍r(jià)          現(xiàn)貨

上海華雅思創(chuàng)生物銷售的Cell Counting Kit-8（CCK-8試劑盒）是從日本進(jìn)口的，由日本Dojindo開發(fā)的檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒，為MTT法的替代方法，試劑盒中采用Dojindo開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8，在日本、美國、歐洲等國家均持有和注冊商標(biāo)。上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司在上海倉庫備有現(xiàn)貨，并嚴(yán)格按照產(chǎn)品的*儲(chǔ)存條件進(jìn)行儲(chǔ)存與管理，我們的一貫宗旨是：更用心地為中國廣大科學(xué)研究工作者提供更安全、更放心、更便捷的服務(wù)。

CCK-8試劑盒圖片

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CCK-8試劑盒的主要產(chǎn)品特性及應(yīng)用

★ 操作簡便，省時(shí)省力
★ 水溶性，不需要換液，尤其適合于懸浮細(xì)胞
★ 無需放射性同位素和有機(jī)溶劑，對(duì)細(xì)胞毒性低
★ 為1瓶溶液，毋需預(yù)制，即開即用
★ 適合于高通量藥物篩選

CCK-8的用途：藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗(yàn)
CCK-8的使用：CCK-8試劑盒在中國中科院、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、中山大學(xué)、四川大學(xué)、武漢大學(xué)等科研院所、*醫(yī)院的中心實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用，受到科研者的高度評(píng)價(jià)，使用CCK-8發(fā)表的文獻(xiàn)達(dá)600多篇，其中截止2008年底SCI影響因子IF＞10分的論文有37篇，zui高IF26.5分。

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