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大鼠分泌型磷脂酶（sPLA2）試劑盒
大鼠分泌型磷脂酶（sPLA2）試劑盒，是在大鼠相關(guān)生理病理研究領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的檢測(cè)工具，用于精準(zhǔn)測(cè)定大鼠樣本中的分泌型磷脂酶含量。分泌型磷脂酶在生物體內(nèi)的磷脂代謝過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，參與眾多生理活動(dòng)，如炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)等。其含量變化與多種大鼠疾病模型密切相關(guān)，例如炎癥性疾病、心血管疾病以及神經(jīng)退行性疾病等，因此該試劑盒對(duì)深入探究相關(guān)疾病機(jī)制、評(píng)估藥物療效意義重大。
該試劑盒主要采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）技術(shù)，具體為雙抗體夾心 ELISA 法。試劑盒內(nèi)的酶標(biāo)板已預(yù)先包被針對(duì)大鼠 sPLA2 的特異性抗體。檢測(cè)時(shí)，先將待檢測(cè)樣本，如大鼠血清、血漿、組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清等，與已知濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品依次加入酶標(biāo)板的反應(yīng)孔中。樣本和標(biāo)準(zhǔn)品中的 sPLA2 會(huì)特異性地與包被抗體結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。隨后加入酶標(biāo)記的另一種 sPLA2 抗體，該抗體能與已結(jié)合在包被抗體上的 sPLA2 進(jìn)一步結(jié)合，構(gòu)建起 “包被抗體 - sPLA2 - 酶標(biāo)抗體" 的夾心結(jié)構(gòu)。經(jīng)過(guò)充分溫育，確?？乖?- 抗體結(jié)合反應(yīng)充分進(jìn)行，再通過(guò)多次嚴(yán)格的洗滌步驟，去除未結(jié)合的多余物質(zhì)。此時(shí)加入顯色底物，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色變化程度與樣本中 sPLA2 的含量呈正相關(guān)?？蒲腥藛T借助酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，依據(jù)預(yù)先繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可精確計(jì)算出樣本中 sPLA2 的含量。
試劑盒組成豐富。包被有特異性抗體的酶標(biāo)板是反應(yīng)的核心載體；不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品用于構(gòu)建精準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，為樣本定量提供可靠參照；酶標(biāo)抗體負(fù)責(zé)催化顯色反應(yīng)，放大檢測(cè)信號(hào)；樣本xi釋液用于對(duì)原始樣本進(jìn)行合理稀釋，使其符合檢測(cè)要求；濃縮洗滌液多次洗滌酶標(biāo)板，有效去除未結(jié)合雜質(zhì)，保障檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性；此外，還配備有顯色劑和終止液，用于精準(zhǔn)控制顯色反應(yīng)的進(jìn)程。
在樣本采集與處理方面，血清采集后需自然凝固并離心取上清；血漿需添加合適抗凝劑后離心獲取上清；組織樣本經(jīng)勻漿處理，充分破碎組織后離心取上清；細(xì)胞培養(yǎng)上清可直接離心取上清用于檢測(cè)。樣本處理完成后，嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明，依次進(jìn)行加樣、溫育、洗滌、顯色及結(jié)果測(cè)定等步驟。試劑盒一般需保存在 2 - 8℃的環(huán)境中，避免反復(fù)凍融，以維持其良好性能，為大鼠相關(guān)疾病研究提供穩(wěn)定、準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，助力科研工作的深入開(kāi)展。
