【青島捷世康】小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒操作步驟

小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿以及相關(guān)液體樣本中抑制素b的含量。

小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒試驗(yàn)操作步驟

1  小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒從2-8度保存環(huán)境中取出需要在實(shí)驗(yàn)室常溫環(huán)境中做溫度平衡處理15-20分鐘,與小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)器具及樣本保持溫度一致后方可使用.以免造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確.

2  小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為360μg/ml，240μg/ml ，120μg/ml，60μg/ml， 30μg/ml）。(ELISA試劑盒:小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒）)

• 加樣：在加注各類用品時(shí)請(qǐng)用的加樣器,使用前校準(zhǔn)加樣器,加樣時(shí)間控制在一定時(shí)間內(nèi)5分鐘為宜.樣品較多時(shí)用產(chǎn)品推薦排槍.分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
• 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
• 溫育：操作同3。
• 洗滌：操作同5。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

ELISA試劑盒:小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒)