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ELISA實(shí)驗(yàn)中顯色弱靈敏度低
在完成所有實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中孔的顯色比較淺,即只有微弱的信號(hào)呈現(xiàn)。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:
產(chǎn)品過有效期,試劑沒有按規(guī)定進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋4妗?br />試劑,標(biāo)準(zhǔn)品或者樣品在使用前沒有平衡到室溫。
少加了試劑的量或者加入試劑的稀釋比例不當(dāng)。
洗板或者加樣過程中,酶標(biāo)物受污染失活。
孵育時(shí)間和孵育溫度未達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求。
洗滌液稀釋倍數(shù)不符合要求,洗板次數(shù)過多,洗板沖擊力過大,洗板浸泡時(shí)間過長。
底物溶液TMB顯色時(shí)間太短。
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