TB1 Chemically Competent Cell

產(chǎn)品規(guī)格 

TB1：                                                          100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl):                    10μl

保存條件(保質(zhì)期)：                             -80℃（6個月） 

基因型

F^– ara Δ(lac-proAB) rpsL (Str^R)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR

TB1 Chemically Competent Cell產(chǎn)品說明

TB1菌株源于JM 83，是JM 83 hsdR型菌株，只含有大腸桿菌RNA polymerase，缺少BL21 (DE3)菌株的T7 RNA polymerase，適合NEB公司的pMAL 系列質(zhì)粒原核蛋白表達(dá) (The pMAL vectors use the E. coli RNA polymerase)，不能用于pET系列質(zhì)粒的表達(dá)，具有鏈霉素抗性。TB1感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率高達(dá)10⁸ cfu/μg DNA。

操作方法

1.TB1感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。