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上海信裕生物科技有限公司
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BRL-LUC(大鼠肝細胞(luc標記))

參   考   價: 3800

訂  貨  量: ≥1 瓶

具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌信裕生物

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時間:2025-03-27 17:22:19瀏覽次數(shù):1368次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
純度 99.9 供貨周期 一周
規(guī)格 1*10^6cells/T25方瓶 貨號 XY-R012L
應用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 主要用途 僅用于科研
BRL-LUC(大鼠肝細胞(luc標記))是生物學和醫(yī)學研究中常用的工具,指從生物體組織或器官中分離出的細胞,在體外培養(yǎng)條件下能夠存活、增殖并保持特定功能的細胞群體。

BRL-LUC(大鼠肝細胞(luc標記))

一、細胞基本屬性

細胞名稱

BRL-LUC大鼠肝細胞(luc標記)

細胞別稱

BRL-LUC

商品貨號

XY-R012L

種屬來源

大鼠

組織來源

生長特性

貼壁生長

細胞形態(tài)

上皮細胞樣

細胞規(guī)格

1×10^6cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測

培養(yǎng)基

90%DMEM+10%FBS

培養(yǎng)條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件

無血清凍存液,液氮儲存

倍增時間

~24-30小時

 

細胞篩選:

該細胞為已經(jīng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染LUC的細胞,隨細胞傳代次數(shù)的增加,其LUC熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。

細胞經(jīng)過20μg/ml嘌呤霉素篩選,平時培養(yǎng)可維持10μg/ml嘌呤霉素

二、細胞接收后的處理

1) 收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于室溫放置約1h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2) 請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3) 貼壁細胞:細胞在室溫中放置1h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4) 細胞運輸途中脫落操作方法:把脫落的細胞收集離心后棄上清,用PBS清洗一遍,離心棄上清,在離心管中加入1ml胰酶吹散消化20秒左右,加培養(yǎng)基終止消化后離心重新鋪平,剩下的貼壁細胞就按照正常貼壁細胞傳代方法操作。

5) 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。

三、細胞培養(yǎng)操作

1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

a) 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。          

b) 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。

c) 輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。          

d) 將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

貼壁細胞傳代注意點:

l 一定要PBS洗一遍。

l 細胞多觀察幾次掌握時間,不要在細胞沒有基本脫落就終止消化然后吹打下來,這樣細胞  更容易分化和死亡。

l 不要一直對細胞吹打

3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a) 收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

b) 根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度1×10^6~1×10^7/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。

c) 將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

四、培養(yǎng)注意事項

1) 細胞出現(xiàn)問題,予以重發(fā)情況

a) 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);

b) 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品3 天內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,核實后重發(fā);

c) 常溫發(fā)貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后2 天后,絕大多數(shù)細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片),重發(fā);

d) 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后2天后或常溫發(fā)貨的細胞靜置2 小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);

e) 細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,和每天的細胞照片,核實后予重發(fā);

f) 細胞收到當天以及第2,3 天請拍照,3 天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7 天內(nèi)出現(xiàn)問題需提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題的照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責任的,重發(fā)。 

2) 細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況

a) 客戶操作造成細胞污染,不重發(fā);

b) 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

c) 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

d) 細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3 天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā);

e) 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);

f) 收到細胞并發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于7 天的,不重發(fā);

g) 視具體情況而定

五、注意事項

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

3. 該細胞僅供科研使用!說明書僅供參考以實際到貨說明書為準!                  

僅用于科研,不能用于臨床診斷!所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于人或動物的治療等任何其他用途,不為任何個人提供產(chǎn)品和服務。以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。

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