腺伴隨病毒PCR試劑盒

Adeno-associated Virus(AAV)

產(chǎn)品及特點

腺伴隨病毒（adeno associated virus,AAV）屬細小病毒科，病毒顆粒 直徑為 20nm，無包膜，20 面體，為目前動物病毒中簡單的一類單鏈線狀 DNA 病毒。人群中，AAV 感染率很高，85%的人呈血清抗體陽性，但是未發(fā) 現(xiàn) AAV 引起人體疾病，甚至早年的流行病學(xué)研究報告認為，AAV 感染者減少 了患癌的危險性。因此快速靈敏檢測腺伴隨病毒具有重要意義。本產(chǎn)品就是為 此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增腺伴隨病毒，與其他病毒沒有交叉 反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

腺伴隨病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。本試劑盒免費贈送 20 次天凈沙核酸釋放劑試用裝

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和 一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要 求的樣品起始量）中加 10μL 腺伴隨病毒 PCR 陽性對照的 1 萬倍稀釋液 而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 136bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴 增，否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。