蜂房小甲蟲PCR試劑盒

Aeromonas spp

產(chǎn)品及特點(diǎn)

蜂房小甲蟲（Aethina tumida）是蜂群的寄生蟲。它的成蟲和幼蟲以蜂子、 蜂蜜和蜂花粉為食,導(dǎo)致幼蜂死亡、蜂蜜發(fā)酵及巢脾被破壞。小甲蟲加速破壞蜂 巢,使成年蜜蜂逃逸。其損害程度可能取決于氣候條件等因素,相比溫度和濕度較 低的地區(qū),蜂房小甲蟲在較高的溫度和高濕度下的危害一般更大。蜂蜜提純?cè)O(shè)備 也是蜂房小甲蟲潛在的繁殖場(chǎng)所,一旦蜂房小甲蟲出現(xiàn)在這種設(shè)備中,這種危害 會(huì)更嚴(yán)重。從卵發(fā)育到成蟲,蜂房小甲蟲需要 3~12 周,周期長(zhǎng)短取決于濕度、溫 度和食物供應(yīng)。成蟲飛行時(shí)所到之處,所有規(guī)模的蜂群都會(huì)被侵?jǐn)_，因此蜂房小 甲蟲的快速檢測(cè)具有重要的意義。本試劑盒根據(jù) PCR 原理開發(fā)，它具有下列特 點(diǎn)： 

1. 即開即用，用戶只需要提供細(xì)菌 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增蜂房小甲蟲。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。 6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

蜂房小甲蟲PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?0μL 陽(yáng)性對(duì)照的10000 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作 為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 20 次免 DNA 提取的天凈沙核酸釋放劑， 本產(chǎn)品的裂解液可以直接作為 PCR 模板，省略了 DNA 提取步驟。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40 μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 109bp。陽(yáng)性對(duì)照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò) 增，否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。