交鏈孢霉屬通用PCR試劑盒

Alternaria spp

產(chǎn)品及特點

交鏈孢霉屬是土壤、空氣、工業(yè)材料上常見的腐生菌，屬于半知菌類，叢 梗孢目，暗色孢科，磚隔孢亞科。分布主要是在植物的葉子、種子和枯草上也 常見到，有的是栽培植物的寄生菌。菌絲暗至黑色，有隔膜，以分生孢子進行 無性繁殖。分生孢子梗較短，單生或叢生，大多數(shù)不分枝，與營養(yǎng)菌絲幾乎無 區(qū)別。本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)檢測交鏈孢霉屬的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增非洲豬瘟病毒，與其他病原沒有交 叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

交鏈孢霉屬通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取 試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個樣品，則需要做 N+2 個提取，包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求 的樣品起始量）中加 10μL 非洲豬瘟病毒 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液 而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰 上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。