伊氏李斯特菌PCR試劑盒

Listeria ivanovii

產(chǎn)品及特點

伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii)是引起人獸共患伊氏李斯特菌病的病原菌，該菌感染宿主中樞神經(jīng)系統(tǒng)是導(dǎo)致高死亡率的主要原因，較容易感染的動物是綿羊，所以該菌又被稱為綿羊伊氏李斯特菌，感染該病菌會給養(yǎng)殖業(yè)帶來較大的經(jīng)濟損失，因此伊氏李斯特菌的快速準確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。本試劑盒根據(jù)熒光定量PCR原理開發(fā)，它具有下列特點：

1.即開即用，用戶只需要提供細菌DNA模板。
2.引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增伊氏李斯特菌。
3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4.PCR mix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次。
6.本產(chǎn)品只能用于科研。

伊氏李斯特菌PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其他試劑。

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。