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參考價:¥1500 ~ ¥3800
更新時間:2024-02-18 11:13:27瀏覽次數:680評價
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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 1×106cells |
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貨號 | E-XB6808 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態(tài) | 長梭狀細胞 | 組織來源 | 實驗動物正常肝組織 |
種屬來源 | 豬 |
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
(8)根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。
豬肝星狀細胞(永生化)
細胞基本屬性:
產品名稱 | 豬肝星狀細胞(永生化) | 組織來源 | 實驗動物正常肝組織 |
種屬 | 豬 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 細胞形態(tài) | 長梭狀不規(guī)則細胞 |
溫度: | 37℃ | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細胞詳細介紹:
背景簡介;肝星狀細胞是細胞外基質的主要來源,正常情況下肝星狀細胞處于靜止狀態(tài)。當肝臟受到炎癥或機械刺激等損傷時,肝星狀細胞被激活,其表型由靜止型轉變?yōu)榧せ钚停涡菭罴毎せ畈⑥D化為肌成纖維細胞樣細胞,各種致纖維化因素均把HSC作為終靶細胞。激活的肝星狀細胞一方面通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成和肝內結構的重建,另一方面通過細胞收縮使肝竇內壓升高。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。 細胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性 培養(yǎng)基;豬肝星狀細胞培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%(細胞懸液變黃)時,即可進行傳代。
(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用??筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。
(4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實驗進度。
(5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。
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細胞周期后期促進蛋白亞基10抗體
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