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上海申知心生物科技有限公司

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細(xì)胞劃痕實驗
細(xì)胞劃痕實驗
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  • 品牌 其他品牌
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更新時間:2023-08-28 19:56:38瀏覽次數(shù):1910

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【簡單介紹】
細(xì)胞劃痕實驗是一種操作簡單,經(jīng)濟實惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是,當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時,在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個空白區(qū)域,稱為“劃痕“。劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進入空白區(qū)域使“劃痕“愈合。
【詳細(xì)說明】


細(xì)胞劃痕實驗是一種簡單易行的檢測細(xì)胞運動的方法,實驗成本低,可以用來檢測貼壁生長腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。

細(xì)胞劃痕實驗是一種操作簡單,經(jīng)濟實惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是,當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時,在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個空白區(qū)域,稱為“劃痕"。劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進入空白區(qū)域使“劃痕"愈合。

基本步驟:“劃痕"的制造,細(xì)胞遷移期間圖像的獲得以及后期數(shù)據(jù)的處理。

步驟

一.準(zhǔn)備:
能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內(nèi))

二.流程:
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X105個細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過12小時能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4.用PBS洗細(xì)胞3次,去處劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6,12,24小時取樣,拍照。

特點:1,在程度上模擬了體內(nèi)細(xì)胞遷移的過程。
     2, 非常適合研究細(xì)胞與胞外基質(zhì)(ECM),細(xì)胞與細(xì)胞之間相互作用引起的細(xì)胞遷移。
     3,與包括活細(xì)胞成像在內(nèi)的顯微鏡系統(tǒng)兼容,可用于分析細(xì)胞間的相互作用。
     4,研究細(xì)胞遷移的體外實驗中簡單的方法。
 
傳統(tǒng)方法:細(xì)胞融合后,用槍頭在細(xì)胞層表面制造劃痕
方法缺陷:人工制造的“劃痕"很難*性,重復(fù)性差。





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