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一、建模方法分類

1. 自體移植模型（主流方法）

基于"經血逆流種植學說"，通過手術將自體子宮組織移植至腹腔或特定部位誘導異位生長。

• 經典操作步驟：

1. 動物選擇：雌性未交配SD或Wistar大鼠（180-270g），動情周期規(guī)律。

2. 術前處理：皮下注射苯甲酸雌二醇（30-150 μg/kg）以促進子宮內膜增殖。

3. 組織獲取：麻醉后開腹切除1-1.5cm子宮角，縱行剖開并修剪成5×5mm內膜片。

4. 移植部位：

• 腹壁肌肉層（血管豐富區(qū)，成功率>80%）

• 卵巢附近或子宮骶韌帶（模擬盆腔EMT）
  5. 固定方式：無損傷縫線將內膜面朝向腹腔縫合，保留肌層以促進血管生成。

• 術后處理：

• 預防性抗生素（如青霉素）及二次雌激素注射維持激素環(huán)境

• 4-8周后開腹評估移植物體積（≥8mm3）及病理特征

2. 同種異體移植模型

用于藥物篩選時避免供體-受體個體差異干擾：

• 操作要點：

• 供體鼠子宮內膜碎片經RPMI1640培養(yǎng)基處理后腹腔注射至受體鼠

• 受體鼠需同步激素處理（雌二醇每4天注射，共2次）

• 優(yōu)勢：標準化移植組織量，適合高通量藥效評價

3. 誘導型模型

通過激素或藥物干預模擬EMT病理環(huán)境：

• 激素誘導：

• DES（二乙基甲合資藥物）聯(lián)合手術，促進血管生成及炎癥反應

• 雌孕激素比例失調：高劑量雌二醇+低孕酮環(huán)境

• 藥物干預：

• GnRH拮抗劑（如Cetrorelix）緩釋植入，誘導慢性低雌激素狀態(tài)

• 亮丙瑞林微球抑制垂體-性腺軸，評估病灶wei縮效果

4. 基因工程模型

新興技術用于機制研究：

• 熒光標記模型：CFP轉基因鼠子宮內膜碎片移植，實現病灶實時追蹤

• 基因敲除模型：針對VEGF、COX-2等靶點構建，但成本高且周期長

二、模型驗證指標

1. 形態(tài)學評估

• 肉眼觀察：移植物呈囊狀隆起，內含黏液或血性液體，血管網豐富

• 體積測量：游標卡尺或光聲成像（PAI）動態(tài)監(jiān)測病灶大小及氧飽和度

• 組織病理學：

• H&E染色：腺體擴張、乳頭狀增生，腺上皮柱狀化

• Masson染色：評估纖維化程度

• PAS染色：檢測糖原沉積（異位內膜特征）

2. 生化與分子指標

• 激素水平：

• 血清雌二醇（E2）升高，孕酮（P4）降低，E2/P4比值失調

• 垂體GnRHR mRNA表達下調提示中樞調控異常

• 炎癥與血管生成：

• IL-6、TNF-α、COX-2等促炎因子升高

• VEGF、FGF等血管生成標志物過表達

• 增殖與凋亡：

• PCNA、Ki67陽性率增加（>30%）

• Bcl-2/Bax比值失衡，Caspase-3活性降低

3. 功能學評估

• 生育影響：模型鼠妊娠丟失率升高，胚胎著床數減少
  

• 疼痛行為：機械性痛閾降低（需結合Von Frey纖維測試）

三、模型比較與適用場景

四、關鍵注意事項

1. 動物選擇：

• 優(yōu)先選用SD大鼠（性周期穩(wěn)定，耐受性強）

• 術前確認動情周期（陰道涂片法），選擇動情前期手術

2. 技術細節(jié)：

• 移植組織需保留基底膜以維持腺體結構

• 縫合時避免壓迫血管，確保血供

3. 倫理與質量控制：

• 嚴格無菌操作，術后鎮(zhèn)痛（如布洛芬混懸液）

• 設立假手術對照組（注射脂肪組織替代內膜）

4. 創(chuàng)新方向：

• 結合MRI或PAI實現無創(chuàng)監(jiān)測

• 開發(fā)類器官共培養(yǎng)模型模擬異位微環(huán)境

五、典型應用案例

1. 藥物評價：

• GnRH激動劑GenSci006顯著縮小病灶體積（抑制率>60%），降低E2水平

• 中藥復方（如加味沒竭片）通過調控ERα/ERβ平衡抑制異位內膜增殖

2. 機制研究：

• 熒光模型揭示VEGF介導的血管新生是病灶存活關鍵

• 基因表達譜分析發(fā)現EMT相關通路（Wnt/β-catenin）異常激活