Carbomix系列色譜柱專(zhuān)為高效分離制備水溶性或部分水溶性 的有機(jī)化合物而設(shè)計(jì)，可用于分離糖類(lèi)、有機(jī)酸、多肽和細(xì)胞代謝物中的生物有機(jī)小分子。Carbomix系列固定相是在低交聯(lián)度（5%、8%和10%）的聚 苯乙烯/二乙烯基苯（PS/DVB）顆粒（5、10 µm）表面鍵合磺酸基團(tuán)（-SO₃H），即為Carbomix H-NP填料；若在此填料上繼續(xù)絡(luò)合不同的離子則形成不同類(lèi)型的填料。如絡(luò)合離子為鈣離子（Ca²⁺），則為Carbomix Ca-NP填料；如絡(luò)合離子為鉛離子（Pb²⁺），則為Carbomix Pb-NP填料；如絡(luò)合離子為鉀離子（K⁺），則為Carbomix K-NP填料；如絡(luò)合離子為鈉離子（Na⁺），則為Carbomix Na-NP填料。

5和10 μm Carbomix填料電鏡圖

Carbomix色譜柱技術(shù)參數(shù)表

(1) 對(duì)于7.8x300 mm柱在zui高溫度下而言，并扣除儀器的背壓。
(2) 對(duì)于固定相為5 μm的5%交聯(lián)度樹(shù)脂、規(guī)格為7.8x300 mm柱的流速是0.1 to 0.15 mL/min。

● 均勻*的粒徑確保了高分辨率和分離的高效性

● 交聯(lián)度：5%、8%和10%

● 與絕大多數(shù)水系流動(dòng)相容（包括純水）

● 離子形態(tài)選擇范圍寬：H⁺、Ca²⁺、Pb²⁺、K⁺和Na⁺

● Carbomix H-NP柱的pH適用范圍為1~3，其他類(lèi)型Carbomix柱的pH適用范圍為5~9

● 包括分析柱和制備柱

均一的粒徑

    Carbomix 固定相粒徑分布極窄，5 µm為5.0±0.2 µm，10 µm為10.0 ± 0.2 µm。如此均一的粒徑分布確保了賽分產(chǎn)品具有高的分離效率和回收率。圖1表明，分離單糖試驗(yàn)中，Carbomix Ca-NP5色譜柱比其他品牌產(chǎn)品具有更高的分離效率。

圖1. 相同分離條件下，在Carbomix Ca-NP5 (5 µm, 8%交聯(lián)度, 7.8 x 300 mm)柱和其它品牌相同規(guī)格鈣柱上分離6種單糖效果對(duì)比。 

不同離子態(tài)

    Carbomix樹(shù)脂多種可選離子態(tài)使得賽分 Carbomix系列柱可廣泛用于各種不同基質(zhì)中糖分子、糖醇和其他水溶性物質(zhì)的優(yōu)質(zhì)分離。例如，樹(shù)膠醛糖、核糖醇、阿糖醇很難在H柱上分離，卻能在Ca 柱上實(shí)現(xiàn)*分離；木糖、半乳糖和甘露糖在Ca柱上是一個(gè)重疊峰，而在Pb柱上則能夠依次單獨(dú)流出。

不同離子態(tài)的選擇

低交聯(lián)度

    Carbomix樹(shù)脂的低交聯(lián)度使其在流動(dòng)相中可以適當(dāng) 的溶脹，尤其在高溫條件下這是實(shí)現(xiàn)大多數(shù)分離任務(wù)的典型模式。這種溶脹可以優(yōu)化分離時(shí)的比表面積、滲透性、容量、選擇性，及改變離子強(qiáng)度。PS/DVB粒 子的交聯(lián)度越低，樹(shù)脂結(jié)構(gòu)就越開(kāi)放，從而使更大分子量的多聚糖也有良好滲透性。圖2表明，在5% Carbomix Ca-NP5柱上，聚己糖(G6)可以很好的從基質(zhì)中分離，并且還能看到聚庚糖(G7)和聚辛糖(G8)的兩個(gè)峰得到了分離；而在8% Carbomix Ca-NP5上不但沒(méi)有G7和G8的峰，連G6的峰都不太明顯。

圖2. 不同交聯(lián)度Carbomix Ca-NP5 (5 µm, 7.8 x 300 mm)柱上麥芽糊精和甘油的流出曲線

色譜柱:      Carbomix Ca-NP5 流動(dòng)相:      H2O 流速:          0.20 mL/min 溫度:          85℃ 進(jìn)樣量:      20 µL 檢測(cè)波長(zhǎng):   192 nm 樣品:       Glucidex (100 mg/mL) and glycerol (10 mg/mL) (G3 to G7 refer to oligosaccharides)

優(yōu)異的穩(wěn)定性

    Carbomix HPLC柱優(yōu)良的制造工藝和*的填裝技術(shù)保證了其具有高的穩(wěn)定性。即使是在升高溫度的條件下，Carbomix樹(shù)脂也能在純水和其他水緩沖體系中保持穩(wěn)定。圖3表明，55℃下，6天內(nèi)連續(xù)沖洗578倍柱體積，酸的保留時(shí)間僅改變了1%。

圖3. Carbomix H-NP5 (5 µm, 8%交聯(lián)度)柱55℃下連續(xù)用5 mM H₂SO₄沖洗后分離有機(jī)酸色譜圖

色譜柱:    4.6x 250 mm 流動(dòng)相:    5 mM H2SO4 流速:        0.30 mL/min    溫度:        55℃ 進(jìn)樣量:     20 µL        檢測(cè):         RI 樣品:         1, Citric acid (50 mM); 2, Acetic acid (100 mM)

穩(wěn)定的批間重現(xiàn)性

    由于采用了可控的表面化學(xué)修飾技術(shù)并嚴(yán)格監(jiān)控聚合物樹(shù)脂的生產(chǎn)過(guò)程，Carbomix柱具有很高的批間重現(xiàn)性。圖4表明，不同批次間的保留時(shí)間誤差在0.3%以內(nèi)。

圖4. 三個(gè)不同批次Carbomix H-NP10 (10 µm, 8%交聯(lián)度)柱分離有機(jī)酸色譜圖

 
多種分離機(jī)理共同作用

    Carbomix樹(shù)脂表面的抗衡離子(H⁺，Ca²⁺，Pb²⁺，K⁺和Na⁺) 能緩和分離過(guò)程。通常，分離的過(guò)程涉及兩種或兩種以上的機(jī)理同時(shí)作用，包括體積排阻、離子排斥、離子交換、配體交換、反相作用及正相作用。對(duì)多糖類(lèi)樣品來(lái) 說(shuō)，體積排阻機(jī)理是主要的作用機(jī)理，如圖4中寡聚糖的分離。而分離單糖時(shí)的主要機(jī)理則主要是配位效應(yīng)，例如Ca型柱中分離葡萄糖的α、β-異構(gòu)體。在實(shí)現(xiàn) 蜂蜜樣品的分離過(guò)程中，首要的機(jī)理為離子排斥作用，該作用使得無(wú)機(jī)鈉離子通過(guò)孔隙被洗脫下來(lái)。而體積排阻和配體交換作用則依次作用于寡聚糖和單糖的分離。 對(duì)于分離有機(jī)酸用的Carbomix H型樹(shù)脂來(lái)說(shuō)，反相作用和離子排阻作用均為首要機(jī)理。疏水性和pKa同時(shí)影響樣品組成的保留時(shí)間。這一特性使得Carbomix H型樹(shù)脂非常適合于監(jiān)測(cè)發(fā)酵過(guò)程中成分的變化。