小鼠Apelin蛋白(APLN)檢測試劑盒為什么實(shí)驗(yàn)過程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。

振蕩孵育使反應(yīng)更充分，振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)96孔微孔板振蕩器。

孵育過程振蕩，可以加快、加強(qiáng)抗原抗體分子間的相互碰撞接觸，使得反應(yīng)過程更加*，OD值通常會比未振蕩孵育的結(jié)果要高；洗滌過程振蕩，可以使洗板更干凈，在很大程度上能降低背景值，同時(shí)可以提高試劑盒檢測的靈敏度，具體操作請參見說明書。

小鼠Apelin蛋白(APLN)檢測試劑盒何時(shí)終止ELISA反應(yīng)。

ELISA實(shí)驗(yàn)zui終需要酶催化底物顯色反應(yīng)來完成，在合適時(shí)間終止反應(yīng)是ELISA實(shí)驗(yàn)成功的重要因素。在HRP-TMB酶促反應(yīng)系統(tǒng)中，當(dāng)zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色不再變深，倒數(shù)2-3個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色開始有淺藍(lán)色時(shí)，便需要終止反應(yīng)；或者也可以根據(jù)zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品孔在620nm的OD值來決定，OD620=0.9-0.95之間時(shí)即可終止。

小鼠Apelin蛋白(APLN)檢測試劑盒為什么酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)必須選用雙波長。

首先，酶標(biāo)儀使用前務(wù)必預(yù)熱10-15min，使測讀結(jié)果更穩(wěn)定。其次，ELISA實(shí)驗(yàn)采用雙波長測定吸光度，可以排除單波長檢測時(shí)的測定干擾（標(biāo)本的濃度，干擾色等）。一般采用zui大波長作為參照波長，在參照波長下，檢測物的吸光值zui小，檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收；因此，雙波長測定，可zui大限度的消除指紋、雜質(zhì)及不透光的物質(zhì)對酶標(biāo)儀讀數(shù)帶來的誤差，以保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度。

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