雙重探針?lè)ㄈ祟?lèi)脲原體實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒

Duplex Probe Real-time PCR Kit for Ureaplasma parvum & Ureaplasma urealyticum

貨號(hào)：Mqt-upr-20      規(guī)格：20個(gè)反應(yīng)

貨號(hào)：Mqt-upr-50      規(guī)格：50個(gè)反應(yīng)

貨號(hào)：Mqt-upr-100     規(guī)格：100個(gè)反應(yīng)

儲(chǔ)存：-20度，避光保存，保質(zhì)期一年。避免反復(fù)凍融。

試劑盒特點(diǎn)：

1，特異性檢測(cè)并區(qū)分微小脲原體和解脲脲原體，可識(shí)別人類(lèi)脲原體的全部十四種血清型，與其他生物基因組沒(méi)有交叉反應(yīng)。

2，使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力強(qiáng)和熱穩(wěn)定性好的特點(diǎn)；采用熱啟動(dòng)方式，可抑制非特異性擴(kuò)增，降低背景熒光。

3，帶有陽(yáng)性對(duì)照樣品，可用于檢驗(yàn)試劑盒有效性。

4，帶有dUTP和UDG酶，可降低殘留DNA的污染。

脲原體（Ureaplasma）是一類(lèi)具有尿素分解能力的支原體，呈球狀或球桿狀，革蘭氏陽(yáng)性，克隆呈煎蛋狀，細(xì)胞直徑在0.1到1.0 µm 之間，于1954年從人類(lèi)泌尿生殖道分離出來(lái)，1974年首先被命名為解脲脲原體（Ureaplasma urealyticum，也有譯為溶脲脲原體），人類(lèi)中目前已知有14種血清型。經(jīng)過(guò)多年的爭(zhēng)論，在2002年，根據(jù)基因組大小、16S rRNA基因序列、16S-23S rRNA基因間隔區(qū)序列、酶的多態(tài)性、DNA-DNA雜交、對(duì)錳的分化反應(yīng)、多帶抗原基因等，將其區(qū)分為兩種生物：解脲脲原體和微小脲原體（Ureaplasma parvum，也有譯為細(xì)小脲原體）。區(qū)分后的解脲脲原體包含的血清型有十種：2、4、5、7、8、9、10、11、12和13，微小脲原體包含的血清型有四種：1、3、6和14。不同血清型對(duì)人體疾病的影響目前尚沒(méi)有一致結(jié)論。這兩種脲原體是健康人常見(jiàn)的泌尿生殖道共生菌，可以單獨(dú)或共同存在，有時(shí)也會(huì)與一些疾病相關(guān)聯(lián)，如：尿道炎、產(chǎn)后子宮-內(nèi)膜炎、絨毛膜羊膜炎、自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、低出生體重、肺炎、菌血癥、腦脊膜炎和早產(chǎn)兒慢性肺病等。目前尚不清楚這些脲原體會(huì)在什么情況下引起疾病，體液免疫系統(tǒng)健全的人一般不會(huì)受其影響。

脲原體的體外培養(yǎng)非常困難，耗時(shí)較長(zhǎng)，靈敏度較低。對(duì)脲原體的分型是依靠針對(duì)全細(xì)胞或純化抗原的單克隆或多克隆抗體，實(shí)驗(yàn)方法包括：生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)、代謝抑制實(shí)驗(yàn)、免疫熒光、免疫過(guò)氧化物酶、ELISA、免疫印跡等，這些方法都比較耗時(shí)費(fèi)力，結(jié)果常常難以重復(fù)，有很多交叉反應(yīng)，在含有多個(gè)血清型的樣本上常難以區(qū)分。而PCR法用于檢測(cè)脲原體，則有更高的靈敏度和更好的特異性，不受其他微生物污染的影響，且檢測(cè)時(shí)間短，僅需幾個(gè)小時(shí)即可獲得結(jié)果。定量PCR法與常規(guī)PCR法相比，不僅可以進(jìn)行定量分析，而且操作更為方便，更少受環(huán)境污染的影響。

本試劑盒選擇脲原體特征性的尿素酶基因作為靶點(diǎn)，將脲原體14種血清型的序列進(jìn)行比對(duì)，設(shè)計(jì)引物和探針，特異性識(shí)別并區(qū)分解脲脲原體和微小脲原體。使用本試劑盒可以準(zhǔn)確區(qū)分脲原體14種血清型的生物分類(lèi)，經(jīng)BLAST驗(yàn)證，與其他生物基因組沒(méi)有交叉反應(yīng)。對(duì)42個(gè)分離培養(yǎng)樣本進(jìn)行檢測(cè)，得到37個(gè)微小脲原體陽(yáng)性，4個(gè)解脲脲原體陽(yáng)性，以及一個(gè)雙重陽(yáng)性，與測(cè)序結(jié)果一致。對(duì)31個(gè)臨床拭子樣本進(jìn)行檢測(cè)，獲得11個(gè)微小脲原體陽(yáng)性，6個(gè)解脲脲原體陽(yáng)性，與常規(guī)PCR法檢測(cè)結(jié)果一致，陽(yáng)性率高于體外培養(yǎng)法，顯示本試劑盒靈敏度高于體外培養(yǎng)法。本試劑盒適用于人類(lèi)脲原體的檢測(cè)和鑒定。

本產(chǎn)品僅供研究使用。

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