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能量來源每一個生長培養(yǎng)基都需要碳源,以供細胞新陳代謝。碳源通常是葡萄糖,但也可以是其他糖類,如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸,谷氨酰胺)。葡萄糖通常以終濃度為5.5mM的含量添加,大約等于人體...
可能原因:1細胞崩解了;2培養(yǎng)基可能污染了,取部分培養(yǎng)基進行檢菌試驗細胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染.他們在細胞培...
1.細胞庫之細胞培養(yǎng)基不加抗生素1.1.培養(yǎng)自ATCC引進之細胞株,培養(yǎng)基中不加抗生素1.2.培養(yǎng)自其它實驗室引進之細胞株,制作tokenfreeze前培養(yǎng)基須添加抗生素,待tokenfreeze通過...
大部分elisa檢測均以血清為標本。血清標本可按慣例方法收集,應留意防止溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標本可能會添加非特異性顯色。血清標本宜...
干細胞治療也被稱為再生醫(yī)學,是指利用干細胞及其衍生物來促進受損、病變或功能喪失的組織進行修復。如今,許多白血病等患者已經(jīng)受益于干細胞治療。未來,骨關(guān)節(jié)炎、腦癱、心臟衰竭、多發(fā)性硬化癥、甚至是聽力損失等...
(1)單獨沖洗,防止交叉反應造成污染。臨床上每天檢測的病例很多,所用的抗體種類及項目也多,如果在加入一抗孵育完后,將它們在一個缸內(nèi)洗,這樣就會造成交叉污染,影響最后的結(jié)果。正確的做法是單獨地進行沖洗,...
PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na?HPO?、KH?PO?、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的...
必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶,對細胞造成損害。細胞復蘇步驟一.實驗前準備:將水浴鍋預熱至37℃。細胞實驗室進行...
牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。主要成分:1.蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份。除...
原代細胞是通過一定的方法如酶法或機械法或生長法使細胞從人體和動物的母體器官、組織或液體中分離出來,并在受控環(huán)境條件下分離的細胞在體外或其他人體和動物體內(nèi)生長。原代細胞的提取方法詳細步驟:1)整個操作要...
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,這些問題從細胞生長角度來說,針對細胞不貼壁、生長緩慢、生長不好,甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞不貼壁可能原因:胰蛋白酶消化過...
血清被廣泛應用于細胞培養(yǎng)達幾十年之久。動物血清主要包括胎牛血清、小牛血清、成牛血清、馬血清、羊血清、雞血清、兔血清等,其中以胎牛血清的使用z為普遍。動物血清在細胞培養(yǎng)中提供細胞增殖所需的生長因子、激素...
一、我們先來說說何為緩凍:緩凍即為凍存細胞時,要程序降溫——4℃30min,-20℃1h,-80℃過夜,次日投入液氮內(nèi)。二、那為什么要進行緩凍呢?其實所謂的緩凍是一般使用傳統(tǒng)凍存液凍存過程中需要程序降...
1、透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標定特定成分進行研究的實驗中。2、碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂...
胎牛血清通常在細胞培養(yǎng)中作為基礎(chǔ)生長培養(yǎng)基的添加劑,在細胞培養(yǎng)中,血清供應了豐富的高分子蛋白,低分子量營養(yǎng)物,疏水載體蛋白和其他體外細胞生長必要的成分如激素和粘附因子。同時,胎牛血清可以增加培養(yǎng)基的緩...
牛血清是細胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。一、血清的成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部...
細胞培養(yǎng)基是人工模擬細胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,是提供細胞營養(yǎng)和促進細胞生長增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同,英文都是medium。當它是粉劑時,傾向性地稱為培養(yǎng)基,而將粉劑配成液體后,多稱...
細胞生長緩慢的常見原因:(1)培養(yǎng)基可能缺乏細胞生長所需的某種因子。通常情況下,當小伙伴購買細胞,并沒有按照ATCC或國內(nèi)細胞庫推薦的方法制備培養(yǎng)基,使用實驗室兄弟姐妹使用的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。解決方法...
1.支原體污染的普遍性支原體污染是細胞培養(yǎng)領(lǐng)域遇到的性問題,據(jù)文獻報道,綜合美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)、美國模式菌種收集中心(ATCC)等機構(gòu)收到的相關(guān)數(shù)據(jù),世界各國細胞系支原體污染的平均比例為...
ELISA即酶聯(lián)吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法。Engvall和Perlmann于1971年先應用該法進行了IgG定量測定,并命名為"enzymelinkedimmunosorbentass...
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