人肺癌細(xì)胞；A549 圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng) 人肺癌細(xì)胞；A549 圖片
形態(tài)特性  上皮樣；多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞系是1972年由Giard DJ通過(guò)肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位58歲的白人男性。A549能通過(guò)胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽(yáng)性。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
傳代方法  1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN9
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR  Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：11；D16S539：11，12；D18S51：14，17；D19S433：13；D21S11：29；D2S1338：24；D3S1358：16；D5S818：11；D7S820：8，11；D8S1179：13，14；FGA：23；TH01：8，9.3；TPOX：8，11；vWA：14；
同工酶 
染色體  62-66
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

L- 苯丙氨酸10g
DNA Shuffling 試劑盒10 次
CAS369-07-3鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
130585-100小鼠抗 CBP 標(biāo)簽單抗100μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 10100 次
L- 脯氨酸25g
纖連蛋白 ( 人血 )1mL
B-5 固定液250 mL
CAS7761-88-8硝酸銀25g
100910-10長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 還原劑10mL
離心管 ( 配研磨杵用 ) 1000 只
魯米諾血跡鑒定試劑盒100mL
半乳糖氧化酶150U猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠維生素D2(VD2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠抗IgE受體抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠二胺氧化酶（DAO）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62/GMP140)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
菜豆凝集素(PHA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬抗凝血酶受體(ATR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
植物纖維素酶(CE)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠組織因子(TF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠鼠痘毒抗體（MPV-Ab）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
NF-κB 激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)試劑盒50 次
CAS9001-12-1膠原酶Ⅱ型100mg
131150-1000山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記1000μL
130978-50柱式血清血漿 RNAout50 次
N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基甘氨酸10g