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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-02 12:56:28瀏覽次數(shù):141次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D11 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant NEL Like Protein 2 (NELL2) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
NEL樣蛋白2(NELL2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D11 |
產(chǎn)品名稱:NEL樣蛋白2(NELL2)重組蛋白人
英文名稱:Recombinant NEL Like Protein 2 (NELL2)
NRP2; Nel-related protein 2; Protein kinase C-binding protein NELL2
型號:GOY-01D11
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:34.4kDa
實際分子量:34kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Pro64~Lys331 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:8.1
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
英文名稱:Recombinant RIO Kinase 1 (RIOK1) 產(chǎn)品名稱:RIO激酶1(RIOK1)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant NADH Dehydrogenase 5 (ND5) 產(chǎn)品名稱:NADH脫氫酶5(ND5)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Ribonuclease A12 (RNASE12) 產(chǎn)品名稱:核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme (ACE) 產(chǎn)品名稱:血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)重組蛋白物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)
英文名稱:Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme (ACE) 產(chǎn)品名稱:血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme (ACE) 產(chǎn)品名稱:血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
δ氨基乙酰丙酸脫水酶抗體 ALAD
乙醇脫氫酶1抗體 AKR1A1
肌萎側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體 ALS2CR4
α2巨球蛋白(α-2M)抗體 alpha 2 Macroglobulin
ACCSL蛋白抗體 ACCSL
甲胎蛋白抗體 AFP
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星形肌動蛋白抗體 ASTN2
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磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體 Phospho-ATRIP (Ser224)
系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體 TREX1
接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體 AP2M1
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禾頂囊殼小麥變種 Gaeumannomyces graminis var. tritici
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串珠菌 Leuconostoc lactis人喉表皮細胞
人結(jié)腸細胞嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
橢孢青霉 Penicillium ellipsoideosporum玫瑰栗色鏈霉菌 Streptomyces rosecastaneus
爪哇根霉 Rhizopus javanicus
黑白輪枝孢
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
小單孢菌 Micromonospora sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
大鼠腸動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.
苜蓿中華根瘤菌杯形禿馬勃 Calvatia cyathiformis
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