蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Aldosterone Synthase (ALDOS)

CPN2; CYP11B; CYP11BL; CYP11B2; P450C18; P450aldo; Steroid 18-hydroxylase; Aldosterone-synthesizing enzyme; Cytochrome P450 Family 11 Subfamily B Polypeptide 2

型號(hào)：GOY-01D3007

酶與激酶

代謝通路

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：58.7kDa

實(shí)際分子量：59kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Gly25~Asn503 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：9.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Janus Kinase 1 (JAK1)產(chǎn)品名稱：Janus激酶1(JAK1)重組蛋白物種：Mouse，小鼠JAK1A; JAK1B; JTK3; Tyrosine-protein kinase JAK1

Recombinant Pyridoxamine-5'-Phosphate Oxidase (PNPO)產(chǎn)品名稱：吡哆胺-5'-磷酸氧化酶(PNPO)重組蛋白物種：Mouse，小鼠PDXPO; Pyridoxine 5'-Phosphate Oxidase

Recombinant Pyridoxal Kinase (PDXK)產(chǎn)品名稱：吡哆醛激酶(PDXK)重組蛋白物種：Mouse，小鼠PKH; PNK; C21orf124; C21orf97; PRED79; Pyridoxine Kinase; Vitamin B6 Kinase

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

MFC-GFP(小鼠前胃細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2gersion

氟米松三甲基乙 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Flumethasone pivalate

 MRC-5(人胚肺成纖維細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2

愛(ài)維莫潘 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Alvimopan

 ARPE-19(人視網(wǎng)膜上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

茚地那韋 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Indinavir

 HL-7702(人肝正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

茚地那韋-d6 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Indinavir-d6

 Dami(人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

,自由 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Tazobactam, Free acid

 小鼠膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱：MouseS

羧芐青 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Carbenicillin

 Acc-2(人涎腺腺樣囊性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

芬達(dá)唑砜 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Fenbendazole Sulfone

 透明質(zhì)酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

(+)-5-反式前列 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 (+)-5-trans Cloprostenol

醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白人10mL β- 巰基乙醇，蛋白級(jí) β-Mercaptoethanol，Protein Grade 常溫保存

雞層連蛋白/板層素(LN)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

50T 大腸桿菌(O1)PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

牛促卵泡素(FSH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X),pH8.0  Tris Buffered Saline(TBS),10X),pH8.0  常溫保存

人CC趨化因子受體7(CCR7)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

1瓶 Hep-2[Hep2]細(xì)胞株 Hep-2[Hep2] 低溫運(yùn)輸和保存

250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.4,2X PBlec Washing Solution in PBS,pH7.4,2X 常溫保存

2 ug pLP2 pLP2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

1mL LAMP可見(jiàn)光染料 LAMP Visible Dye -20℃保存

大鼠Ⅴ型膠原(Col Ⅴ)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝