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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白人
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-02 13:05:06瀏覽次數(shù):203次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D21 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
英文名稱:Recombinant TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2) 產(chǎn)品名稱:內(nèi)皮細(xì)胞TEK激酶(Tie2)重組蛋白物種:Danio rerio (Zebrafish,斑馬魚)
英文名稱:Recombinant TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2) 產(chǎn)品名稱:內(nèi)皮細(xì)胞TEK激酶(Tie2)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2) 產(chǎn)品名稱:內(nèi)皮細(xì)胞TEK激酶(Tie2)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:中文名稱100:胃原A(PGA)重組蛋白 產(chǎn)品名稱:
英文名稱:Recombinant Pepsinogen A (PGA) 產(chǎn)品名稱:胃原A(PGA)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Pepsinogen A (PGA) 產(chǎn)品名稱:胃原A(PGA)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D21 |
產(chǎn)品名稱:ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白人
英文名稱:Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)
cPLA2delta; Cytosolic phospholipase A2 delta
型號:GOY-01D21
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:42.8kDa
實際分子量:43kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Pro9~Leu120 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Attractin蛋白抗體 Attractin
ATPIF1蛋白抗體 ATPIF1
磷酸化有絲分裂激酶B抗體 Phospho-Aurora B(Tyr12)
肌動蛋白相關(guān)蛋白M1抗體 ARPM1
ALKB蛋白抗體 ABH1
乙酰?;D(zhuǎn)移酶1抗體 ACAA1
磷酸化β-肌動蛋白抗體 phospho-beta Actin (Tyr53)
磷酸化能受體β2/β2-AR 抗體 phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346)
載脂蛋白D抗體 APOD
酸敏感離子通道1抗體 ASIC1/BNaC2/ASIC1A
磷酸化能受體β2/β2-AR抗體 phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356)
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端) ADAR1 (C-terminus)
ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白人Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基
香菇 Lentinula edodes地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
酸鏈球菌 Lactococcus lactis希爾正青霉 Eupenicillium shearii
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae
Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit/Nc-細(xì)胞核-漿蛋白抽提試劑盒人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞小鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
異常漢遜酵母 Hansenula anomala桿菌屬 Lactobacillus sp.
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
鏈霉菌 Streptomyces sp.植物桿菌 Lactobacillus plantarum
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人低分化前胃細(xì)胞香菇 Lentinula edodes
HBE(人支氣管上皮樣細(xì)胞)lovo, 人結(jié)腸細(xì)胞
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus
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